[发明专利]一种新的多肽——GTP酶的Rho家族活性位点27和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——GTP酶的Rho家族活性位点27，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

Rho蛋白家族是GTP酶家族的一个分枝，大部分的Rho蛋白从浆膜受体转导信号，通过肌动蛋白细胞骨架的形成来控制细胞粘着、运动和形状等，也可以激活其他激酶链。和其他GTP酶一样，Rho蛋白也是担当分子开关，有一个活性的GTP结合构造和一个非活性的GDP结合构造，活性的GTP结合构造受鸟嘌呤核苷交换因子激活；而非活性的构造由GTP酶激动蛋白刺激GTP酶内在活性而进一步激活。

除了GAP活性结构域以外，Rho蛋白还包括一些与SH2、SH3、丝氨酸/色氨酸激酶和pleckstrin结构相类似的结构域以及一些富含脯氨酸的部分。这些结构域的其中一些，已知与介导蛋白与蛋白之间的相互作用有关。与蛋白——蛋白之间的联接很可能间接地控制Rho蛋白的亚细胞分布。除了chimerin外，Rho蛋白的分布非常广泛，所以为了防止Rho蛋白的永久失活，需要紧密调控。

Rho蛋白和Ras蛋白的晶体结构非常相似，有41个相同残基，大部分位于鸟嘌呤核苷结合位点附近。所以，两个家族的GTP水解开关作用途径也是非常相象。而保守结构之间的不同，反映了他们在激活的靶组织上的相异。相对而言，Rho蛋白家族和Ras蛋白家族的GAP螺旋域在四级结构和顺序上没有找到相似点。

Rho蛋白的一种——Cdc42Hs，通过激活感受器，来影响细胞骨架的生成、细胞增殖和JNK信号途径的调节。对它的晶体结构研究显示，Rho蛋白主要是通过开关Ⅰ、开关Ⅱ和P环来完成介导作用。

由于如上所述GTP酶的Rho家族活性位点27蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的GTP酶的Rho家族活性位点27蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新GTP酶的Rho家族活性位点27蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——GTP酶的Rho家族活性位点27以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码GTP酶的Rho家族活性位点27的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码GTP酶的Rho家族活性位点27的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产GTP酶的Rho家族活性位点27的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——GTP酶的Rho家族活性位点27的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——GTP酶的Rho家族活性位点27的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与GTP酶的Rho家族活性位点27异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中588-1328位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1928位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制GTP酶的Rho家族活性位点27蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。