[发明专利]一种新的多肽——人二肽氨肽酶28和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人二肽氨肽酶28，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

脯氨酰寡聚肽酶蛋白家族包含许多在进化上有联系的肽酶，其切割肽链的催化功能一种电荷传递系统提供，类似于丝氨酸蛋白酶。这一家族包括的酶有：

脯氨酰内切肽酶(PE)，此酶切割肽段的C末端，其切点在脯氨酸处。在人和细菌中发现的PE的序列非常保守。

细菌蛋白酶Ⅱ，切割肽段的C末端，切点在脯氨酸和精氨酸处。

二肽酶Ⅳ(DPPⅣ)。DPPⅣ从多肽的N端依次切割二肽，条件是N端的第二个残基是脯氨酸。

酵母液泡二肽氨基肽酶A,B(DPAP A,B)；

酰基肽水解酶。

这一家族的特征性保守序列是：D-x(3)-A-x(3)-[LIVMFYW]-x(14)-G-x-S-x-G-G-[LIVMFYW],1992年，Wada等发现了两种编码在牛和鼠脑中发现的类二肽氨肽酶DPPX蛋白的cDNA。他们将其命名为DPPX-S和DPPX-L。它们都属于脯氨酰寡聚肽酶蛋白家族，二者的跨膜区和C末端的膜外区域是一致的。DPPX-S mRNA在脑和周边组织例如肾脏、睾丸和卵巢等中都表达，而DPPX-L只在脑中表达。在心脏，肝脏和脾脏中二者都不表达。原位杂交表明二者在脑中分布不同。DPPX-LmRNA只在脑中的有限范围内表达，在松果体中表达量最高。而DPPX-S则在脑中较大的范围内表达。二者表达谱的不同表明二者代谢的多肽是有区域局限性的。

本发明的多肽与上述的DPPX-S有48％的相同性，69％的相似性，并且包含二肽氨肽酶家族特征性的保守序列，因此认为此蛋白是一种新的二肽氨肽酶，具有与DPPX-S相似的生物学功能，并命名为人二肽氨肽酶XX。

由于如上所述人二肽氨肽酶28蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人二肽氨肽酶28蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人二肽氨肽酶28蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人二肽氨肽酶28以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人二肽氨肽酶28的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人二肽氨肽酶28的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人二肽氨肽酶28的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人二肽氨肽酶28的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人二肽氨肽酶2 8的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人二肽氨肽酶28异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中29-787位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1 769位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人二肽氨肽酶28蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。