[发明专利]一种新的多肽——人ke1ch蛋白19和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人kelch蛋白19，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞之间的相互通讯联系在多细胞的有机体中起着及其重要的作用。由于细胞间存在着精细的分工，一些细胞群体有赖于其他细胞群体，并要求其他细胞群体对其产生应答反应。这种精巧的细胞间通讯网络可以控制细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种其他的生命过程。

在许多种系生物的精子和卵子发育过程中，发育中的精子或卵子通过环管从其周围的细胞里得到营养物质。环管的形成与肌动蛋白纤维有关。现在已经知道有一些基因参与环管的组装和功能，其中一类是含有Kelch结构域的基因家族。Kelch蛋白家族都含有两个共同的结构，在N末段有BTB/POZ区域，在C末段有kelch重复序列[Soltysik-Espanola M et al,Mol biol Cell 1999 Jul]。

Kelch结构域是一个50个氨基酸残基的结构域，最早是在果蝇的突变体中发现的。这个结构域在果蝇卵室调节蛋白中出现了6次，并且还在鼠蛋白MIPP和一些痘病毒中发现。【CELL 72 681-693(1993)】此外，Kelch重复还在α、β-scruin【J.CELLSCIENCE 108 3155-3162(1995).】【J.CELL BIOL.128 51-60(1995)】和真菌的半乳糖氧化酶中发现【J.MOL.BIOL.2 36 1277-1282(1994).】。对半乳糖氧化酶的结构分析发现，这一重复序列与在超桶折叠结构中由4束反平行β-折叠结构域所构成的重复单元有关。【J.MOL.BIOL.138 794-814(1994).】Kelch重复的特征序列由几个部分组成了一个β折叠：结构域1包括特征性的GG二肽；结构域2包括一个保守的色氨酸残基。而几个这样的β折叠形成一个β螺旋桨式结构。

Kelch蛋白家族在环管形成、神经纤维定位、细胞融合、细胞形态形成等在发育过程中与细胞骨架有关的生理过程中起重要作用[Soltysik-espanola M,Mol biolCell 1999；Philips J,J Cell biol 1998；]。例如，在果蝇中，kelch蛋白被定位在环管的内侧面，它使环管侧面保持紧束的状态。Kelch蛋白突变会造成卵子周围的护卫滋养细胞通过环管向卵子输送胞质这一过程受到阻碍[Xue F,Cooley L,Cell1993 Mar 12]。Kel-1蛋白的缺失会导致幼虫早期的生长停滞[Ohmachi M,genes Cells1999]。由于在包括人在内的许多生物的精子、卵子形成过程中都发现了环管结构和具有kelch结构的蛋白，因此可以认为kelch蛋白对精卵形成的作用具有普遍意义。又如在脑内发现的kelch蛋白Mayven可能在脑细胞肌动蛋白细胞骨架的动态组织中起作用[Soltysik-Espanola M,Mol Biol Cell 1999]。

包含Kelch结构域的蛋白的功能并不完全相同：除在环管蛋白中的作用与细胞骨架有关之外，还在其他一些蛋白中发现：例如：scruin是一个机动蛋白交联蛋白，在精子顶体形成中起重要作用；在真菌中发现的半乳糖氧化酶催化D-半乳糖C6位的羟基的氧化；神经氨酸苷酶(唾液酸苷酶)水解糖蛋白的唾液酸残基，一般存在于溶酶体内，但也有以分泌形式存在的，还存在于一些病毒、细菌、真菌和原生动物的表面，例如，此酶是流感病毒传染所必须的。

本发明的多肽含有kelch结构域，由此认为是一种新的kelch蛋白，并推定有类似的生物学功能，命名为人kelch蛋白XX。

由于如上所述人kelch蛋白19蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人kelch蛋白19蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人kelch蛋白19蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人kelch蛋白19以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人kelch蛋白19的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人kelch蛋白19的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。