[发明专利]一种新的多肽——人钼蝶呤氧化还原酶10和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人钼蝶呤氧化还原酶10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

有一些原核生物的氧化还原酶需要结合钼蝶呤才能发挥催化作用。这类酶包括：

大肠杆菌呼吸硝酸盐还原酶。这种酶复合物使大肠杆菌在厌氧生长时能够利用硝酸盐作为电子受体。这个酶由3个不同的链组成，α、β和γ。α链(由基因narG编码)是钼蝶呤结合亚基。大肠杆菌还编码一个呼吸硝酸盐还原酶的类似酶，同样含有一个钼蝶呤结合的α链(由基narZ编码)。

大肠杆菌厌氧二甲基亚砜还原酶(DMSO还原酶)。DMSO还原酶是在厌氧生长中的最后一步的还原酶，催化亚砜和N-氧化物的还原。DMSO还原酶由3个链(A,B,C)组成，其中A链是结合钼蝶呤的亚基。

甲烷杆菌甲酸脱氢酶。此酶的α链(基因fdhA)与钼蝶呤配基结合。

大肠杆菌甲酸脱氢酶H(基因fdhF)，N(基因fdnG)，和O(基因fdoG)。这些酶催化甲酸到二氧化碳的反应。除了与钼蝶呤结合之外，α亚基还包含一个活性位点——硒代半胱氨酸。

大肠杆菌三甲胺-N-氧化物还原酶(基因torA)；

硝酸盐还原酶

这些酶都有同源的序列，其中有三段可以作为特征性的序列，第一段是N端的保守序列，包含两个半胱氨酸残基，可能参与结合钼蝶呤配基。这一序列在bisC中不存在。第二个序列位于酶的中心部分。

[STAN]-x-[CH]-x(2,3)-C-[STAG]-[GSTVMF]-x-C-x-[LIVMFYW]-x-[LIVMA]-x(3,4)-[DENQKHT]，除bisC/bisZ和torA之外都含有。STA]-x-[STAC](2)-x(2)-[STA]-D-[LIVMY](2)-L-P-x-[STAC](2)-x(2)-E，除fdnG,fdoG和nasA/napA/narB外都含有。A-x(3)-[GDT]-I-x-[DNQTK]-x-[DEA]-x-[LIVM]-x-[LIVMC]-x-[NS]-x(2)-[GS]-x(5)-A-x-[LIVM]-[ST]，除nasA/napA/narB外都含有。

本发明的多肽含有钼蝶呤氧化还原酶家族的特征性同源序列，因此认为是一种新的钼蝶呤氧化还原酶，具有类似的生物学功能，命名为人钼蝶呤氧化还原酶XX。

由于如上所述人钼蝶呤氧化还原酶10蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人钼蝶呤氧化还原酶10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人钼蝶呤氧化还原酶10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人钼蝶呤氧化还原酶10以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人钼蝶呤氧化还原酶10的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人钼蝶呤氧化还原酶10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人钼蝶呤氧化还原酶10的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人钼蝶呤氧化还原酶10的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人钼蝶呤氧化还原酶10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人钼蝶呤氧化还原酶10异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中387-656位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-847位的序列。