[发明专利]一种新的多肽——人PDZ蛋白20和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人PDZ蛋白20，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

PDZ结构域是一种长度为80-100个氨基酸残基重复序列的结构域，又称为DHR或GLGF结构域。PDZ结构域以前只在哺乳动物、蠕虫和果蝇中发现，现在在酵母，植物和细菌中也发现了它的类似物。[Protein Sci 1997 Feb；6(2):464-8]

PDZ结构域在许多与膜信号传递有关的蛋白中发现，例如离子通道蛋白，受体簇蛋白，将受体和其耦联的发挥生物学功能的酶联系起来的蛋白等。PDZ结构域还在鸟苷酸激酶同源蛋白的MAGUK家族，几种蛋白磷酸酶和激酶，神经元一氧化氮合成酶，以及几种肌营养不良蛋白中发现。[Bioessays 1997 Jun；19(6):469-79]在鼠的Shrm蛋白中发现的PDZ结构域与细胞骨架结构的多层次的调节有关。[Cell 1999 Nov24；99(5):485-97]

PDZ结构域是一种与蛋白识别有关的结构。包含此结构的某些蛋白与离子通道或受体的C末端的四肽结构域X-Ser/Thr-X-Val-COO-相结合。研究发现C末端四肽结构域通过反平行的主链与β折叠相互作用而与PDZ结构域相结合。C末端四肽结构的识别是由一个Gly-Leu-Gly-Phe环和一个精氨酸侧链形成的主链氨基的篮状结构完成的。[Cell 1996 Jun 28；85(7):1067-76]，还有一些PDZ结构域形成同型二聚体，例如神经元一氧化氮合成酶的PDZ结构域与PSD-95蛋白的PDZ结构域相结合。[Nature 1996 Aug 15；382(6592):649-52]神经元一氧化氮合成酶还可能与多肽的Asp-X-Val末端相结合。这类多肽包括谷氨酸和褪黑激素受体。[Nat Biotechnol 1997Apr；15(4):336-42]

本发明的多肽含有PDZ结构域，因此可以认为是一种新的PDZ家族的成员，具有相似的生物学功能，并命名为人PDZ蛋白XX。

由于如上所述人PDZ蛋白20蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人PDZ蛋白20蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人PDZ蛋白20蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人PDZ蛋白20以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人PDZ蛋白20的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人PDZ蛋白20的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人PDZ蛋白20的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人PDZ蛋白20的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人PDZ蛋白20的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人PDZ蛋白20异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中233-778位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1274位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。