[发明专利]一种新的多肽——人色素性视网膜炎相关蛋白14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人色素性视网膜炎相关蛋白14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

色素性视网膜炎(Retinitis pigmentosa，RP)是一种遗传性人类视网膜退化性疾病。视网膜中的光接收细胞，主要是视杆细胞，发生退化，引起视觉减退甚至导致失明。色素性视网膜炎有体细胞显性遗传、体细胞隐性遗传和X染色体连锁的隐性遗传三种遗传形式。很明显，色素性视网膜炎是由多个基因共同作用而导致的。

CRB1是一种与视网膜杆状细胞退化有关的基因。此基因编码的蛋白包含19个类EGF结构域，3个层粘连蛋白AG结构域和一个C类凝集素结构域。类EGF结构域包含30-40个氨基酸残基，最先在表皮生长因子EGF中发现。【New Biol.2：410-419(1990).】后来在许多其他种类的蛋白中都有发现其保守序列。类EGF结构域大多存在于膜结合蛋白阿细胞外部分或者存在于分泌蛋白中。类EGF结构域包含6个半胱氨酸残基形成二硫键。主结构是一个两束β折叠后接一个环状结构。在保守的半胱氨酸之间的长度在不同的蛋白中变化较大：

                +-------------------+         +-------------------------+

                ｜                  ｜        ｜｜  x(4)-C-x(0，48)-C-x(3，12)-C-x(1，70)-C-x(1，6)-C-x(2)-G-a-x(0，21)-G-x(2)-C-x

      ｜                    ｜************************************

       +-------------------+

在大部分的类EGF结构域中，位于第5和第6个保守的半胱氨酸之间至少存在一个保守的赖氨酸残基。这一段保守的特征序列是：C-x-C-x(5)-G-x(2)-C以及：C-x-C-x(2)-[GP]-[FYW]-x(4，8)-C

CRB1蛋白与在果蝇中发现的团粒蛋白(crumbs，CRB)同源，因此被称为团粒蛋白同源蛋白1(crumbs homologue，CRB1)。CRB蛋白是一种膜整合蛋白，在细胞外部分包含30个类EGF重复和四个层粘连蛋白AG结构域。此蛋白位于上皮细胞的顶部，相邻细胞之间的边界处。CRB蛋白的作用是在上皮细胞发育时建立以及维持上皮细胞的极性。CRB蛋白的突变会导致外胚层来源的上皮细胞的排列混乱，严重时会导致这些组织中的细胞死亡。【Trends Genet 1994Aug；10(8)：275-80】

CRB1与CRB同源可能意味着CRB1蛋白在细胞间相互作用中起作用，还有可能在维持视网膜杆状细胞极性形状中起作用。【Nat Genet 1999Oct：23(2)：217-21】

本发明的多肽与CRB1蛋白在蛋白水平上有96％的同源性，并且含有类EGF结构域，因此认为是一种新的CRB1蛋白，具有类似的生物学功能，命名为人色素性视网膜炎相关蛋白xx。

由于如上所述人色素性视网膜炎相关蛋白14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人色素性视网膜炎相关蛋白14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人色素性视网膜炎相关蛋白14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人色素性视网膜炎相关蛋白14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人色素性视网膜炎相关蛋白14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人色素性视网膜炎相关蛋白14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人色素性视网膜炎相关蛋白14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人色素性视网膜炎相关蛋白14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人色素性视网膜炎相关蛋白14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。