[发明专利]新的人包膜蛋白及其编码序列

说明书

本发明属于生物技术领域和遗传工程领域，具体地说，本发明涉及了一种新的多肽一人包膜蛋白(Novel Human Env protein，简称“BioENVP”)，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

大多数逆转录病毒都能引起肿瘤，它们的基本生活周期包括两阶段：阶段一是单链RNA转为双链DNA，阶段二是进行转录，最终形成两个多聚蛋白，经切割分别形成逆转录酶、外壳蛋白和包膜蛋白。

包膜蛋白(Env protein)是特异糖蛋白，以蛋白三聚体形式存在。如HIV的env基因产物一毒粒表面糖蛋白，在病毒与细胞相相互作用的早期阶段也有一定的作用。HIV的变异主要在包膜蛋白，它的变异有一定的规律性，主要集中在V1-V5区，C区的氨基酸序列则相当保守。HIV抗原的变异性是病毒逃避宿主免疫反应的主要机制。包膜蛋白对于病毒和寄主细胞膜的融合起作用。

Env基因最初编码的一个蛋白经糖基化后分子量增至160KD，为包膜糖蛋白前体gp160。该前体蛋白在蛋白酶作用下被切割成gp120和gp41，gp120暴露于病毒包膜之外称外膜蛋白，感染细胞时可与细胞的CD4受体蛋白结合；gp41是跨膜蛋白，多由疏水性氨基酸构成，嵌入在病毒包膜脂质中。当gp120与受体CD4结合后，其构象改变导致与gp41分离，暴露出的gp41可插入细胞膜，造成膜融合致使病毒颗粒核心被导入细胞。gp120有多个糖基化位点，其糖基化是gp120与CD4受体结合所必需的[侯云德主编，科学出版社出版的《现代分子病毒学选论》，1994年出版，第285-288页]。

在人基因组里有内源的K型逆转录病毒(HERV-K)约50个复制片段，在一些肿瘤细胞株里也有发现它的转录物，在一些恶性组织和外周血的单核细胞中发现有HERV-K包膜的转录物[Willer A，et al.Virus Genes 1997；15：123-33]。

研究表明，包膜蛋白与一些疾病密切相关，例如免疫紊乱、肿瘤、癌症等。因此，为治疗目的研究和开发人乙醇脱氢酶有重要意义。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人包膜蛋白(简称为“BioENVP”)以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该BioENVP多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码BioENVP的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码BioENVP的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产BioENVP的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的BioENVP多肽的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明BioENVP多肽的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断和治疗与BioENVP异常相关的疾病的方法。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的人包膜蛋白(BioENVP)，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽或其氨基酸变异不超过5％的衍生物。

在本发明的第二方面，提供编码分离的这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少70％相同性：(a)编码上述BioENVP的多核苷酸：(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的多肽。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1161-1664位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2025位的序列。

在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。

本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

下列附图用于说明本发明的具体实施方案，而不用于限定由权利要求书所界定的本发明范围。

图1是本发明的人包膜蛋白BioENVP和Human endogenous retrovirus K的包膜蛋白(Y17832)的氨基酸序列同源性比较图。相同氨基酸在两个序列间用单字符氨基酸表示，相似氨基酸用“+”表示。