[发明专利]一种新的人锌指蛋白及其编码序列

说明书

本发明涉及发育生物学，神经生理学，分子生物学，肿瘤学，病毒学及基因工程领域。具体地，本发明涉及一种在人类肾上腺中表达的锌指蛋白hZNFshgc及其核酸序列。本发明还涉及该蛋白和核酸序列的制备方法和用途。

锌指结构是指肽链上结合DNA的特定短序列，通过结合DNA来调控基因的转录与表达，因而包含有锌指结构的蛋白广泛参与了转录调控的生理过程。(J Mol Biol1999 Oct 22；293(2)：215-8)。

ZNF140是Kruppel锌指蛋白超家族的成员之一。ZNF140包含有一个KRAB(Kruppel-associated box)片段，抑制基因的表达(Genomics 1995 May20；27(2)：259-64，FEBS Lett 1995 Aug 7；369(2-3)：153-7)。

本发明中，hZNFshgc是一个新的锌指蛋白，它与ZNF140同源。蛋白结构决定了它的生理功能，可以说明本发明中的hZNFshgc有与ZNF140相似或者相同的功能。

在本申请之前，尚没有公开或报道过本发明所涉及的人锌指蛋白hZNFshgc。

本发明的第一目的就是提供一种新的人基因锌指蛋白hZNFshgc(GenbankAccession No.AF155656)，该基因是一个锌指蛋白hZNFshgc基因。

本发明的第二目的是提供一种新的人锌指蛋白hZNFshgc。

本发明的第三目的是提供一种利用重组技术生产上述的新的人锌指蛋白hZNFshgc和核酸序列的方法。

本发明还提供了这种锌指蛋白hZNFshgc多肽和编码序列的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，该分子包括：编码具有人锌指蛋白hZNFshgc活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ IDNO.6中从核苷酸第214-1449位DNA分子的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.6中从核苷酸第214-1449位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地，所述的序列具有SEQ ID NO.6中从核苷酸第214-1449位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离出的人锌指蛋白hZNFshgc多肽，它包括：具有SEQ ID NO.7氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO.7序列的多肽。

在本发明的另一方面，还提供了一种载体，它包含上述的DNA分子。

在本发明的另一方面，还提供了一种用上述载体转化的宿主细胞。在一个实例中该宿主细胞是大肠杆菌；在另一实例中，该宿主细胞是真核细胞。

在本发明的另一方面，还提供了一种产生具有人锌指蛋白hZNFshgc活性的多肽的方法，该方法包括：

(1)将编码具有人锌指蛋白hZNFshgc活性的多肽的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成人锌指蛋白hZNFshgc表达载体，所述的核苷酸序列与SEQID NO.6中从核苷酸第214-1449位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(2)将步骤(1)中的表达载体转入宿主细胞，形成人锌指蛋白hZNFshgc的重组细胞；

(3)在适合表达人锌指蛋白hZNFshgc多肽的条件下，培养步骤(2)中的重组细胞；

(4)分离出具有人锌指蛋白hZNFshgc活性的多肽。

较佳地，在该方法中使用的核酸序列具有SEQ ID NO.6中第214-1449位的序列。

本发明还提供了与锌指蛋白hZNFshgc多肽特异性结合的抗体。

在本发明中，“分离的”、“纯化的”或“基本纯的”DNA是指，该DNA或片段已从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来，还指该DNA或片段已经与天然状态下伴随核酸的组份分开，而且已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开。