[发明专利]一种新的人巨糖蛋白相关蛋白及其编码序列

说明书

本发明涉及分子生物学、生理学、酶学以及基因工程领域。具体地，本发明涉及一种在人类肾上腺中表达的hGP蛋白及其核酸序列。本发明还涉及该蛋白和核酸序列的制备方法和用途。

巨糖蛋白(large glycoprotein，G1)是多种病毒生命活动不可或缺的蛋白之一。加州脑炎病毒(California encephalitis virus)感染蚊子与哺乳动物细胞的体外试验以及经口传染蚊子的试验均被证实G1蛋白在这些过程中必不可少。(Virology 1995 Feb 1；206(2)：945-53)。在鼠中，G1基因定位于两个可能的肿瘤抑制因子基因旁边，而且其序列不论在鼠中还是人中都非常保守，表明这段序列可能有重要的生理意义。(Genomics 1997 Dec 15；46(3)：483-6)。G1相关基因的表达产物GP蛋白(G1-related protein，GP)，参与了多种免疫信号途径。(JImmunol 1995 Oct 1；155(7)：3385-400)

本发明中，我们在人类肾上腺中克隆到家鼠GP基因的同源基因。在本发明被公布之前，尚未有任何公开或报道过本专利申请中提及的人类hGP蛋白序列及其核酸序列。

本发明的第一目的就是提供一种新的人基因hGP(Genbank AccessionNo.AF155650)，该基因是一个人hGP蛋白基因。

本发明的第二目的是提供一种新的人蛋白hGP。

本发明的第三目的是提供一种利用重组技术生产上述的新的人hGP蛋白和核酸序列的方法。

本发明还提供了这种人hGP蛋白多肽和编码序列的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，该分子包括：编码具有人hGP蛋白质活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.6中从核苷酸第35-855位DNA分子的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.6中从核苷酸第35-855位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地，所述的序列具有SEQ ID NO.6中从核苷酸第35-855位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离出的人hGP蛋白质多肽，它包括：具有SEQ ID NO.7氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO.7序列的多肽。

在本发明的另一方面，还提供了一种载体，它包含上述的DNA分子。

在本发明的另一方面，还提供了一种用上述载体转化的宿主细胞。在一个实例中该宿主细胞是大肠杆菌；在另一实例中，该宿主细胞是真核细胞。

在本发明的另一方面，还提供了一种产生具有人hGP蛋白质活性的多肽的方法，该方法步骤如下：

(1)将编码具有人hGP蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成人hGP蛋白表达载体，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.6中从核苷酸第35-855位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(2)将步骤(1)中的表达载体转入宿主细胞，形成人hGP蛋白的重组细胞；

(3)在适合表达人hGP蛋白多肽的条件下，培养步骤(2)中的重组细胞；

(4)分离出具有人hGP蛋白活性的多肽。

较佳地，在该方法中使用的核酸序列具有SEQ ID NO.6中第35-855位的序列。

本发明还提供了与hGP蛋白多肽特异性结合的抗体。

在本发明中，“分离的”、“纯化的”或“基本纯的”DNA是指，该DNA或片段已从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来，还指该DNA或片段已经与天然状态下伴随核酸的组份分开，而且已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开。