[发明专利]一种新的多肽——人肝细胞核因子12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人肝细胞核因子12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

肝细胞核因子3/fork head(HNF/fkh)结构域是一进化上保守的DNA结合基序。从酵母到哺乳动物的所有真核生物的许多转录因子中均含有该结构基序。这些转录因子在胚胎发育过程中起着重要的作用，维持着细胞分化的状态及原癌基因的表达。1996年，Kaufmann等已从Xenopous laevis中克隆得到了14个编码forkhead相似蛋白的不同的基因XFD1-10、XFLIP、XFKH4及XFKH5；同年，Chen等还克隆得到了编码FAST-蛋白的基因；1998年，Manfred Koster等人又从Xenopuslaevis中克隆得到了编码XFD-11蛋白的基因，该蛋白也含有进化上保守的forkhead/HNF-3结构域，其为肝细胞核因子3/fork head(HNF/fkh)蛋白家族[ManfredKoser,Karin Dillinger et al.,Mech.Dev.,1998,76:169-173]

肝细胞核因子3/fork head(HNF/fkh)蛋白家族在生物体内分布非常广泛，该家族的成员均含有一由84-105个氨基酸残基组成的长度不等的特征性结构与---HNF/fkh结构域。HNF/fkh蛋白家族成员按其结构域原始序列的不同又可分为几个不同的亚类，不同亚类的家族成员除DNA结合结构域高度保守外，其余区域均没有明显的相似性(Chuan li,Philio W.Tucker；Proc.Natl.Acad.Sci.USA1993,90:11583-11587)。HNF/fkh结构域为DNA蛋白结合结构域的一种，其在生物体内主要参与与特定的DNA序列结合以调控各种不同的基因的表达，并使其发挥正常的生物学功能。研究发现，HNF/fkh蛋白家族的成员在生物体内具有许多重要的生物学功能，其与胚胎发育、细胞分化和增殖、各种器官形成、艾滋病等免疫缺陷性疾病、冠心病、各种肝脏疾病及各种肿瘤、癌症的发生均有一定的关系

HNF/fkh结构域由10个独立的结构单位组成。其N末端有一钩状结构，后跟两个亲水性螺旋结构。这两个螺旋结构被一转角结构分开，既DNA结合结构域花式结构中的α螺旋-转角-α螺旋结构。该结构域在转录因子与特定DNA序列相互作用，调节各种基因的表达过程中起着重要的作用。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与人FD23的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人肝细胞核因子12。

由于如上所述人肝细胞核因子12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人肝细胞核因子12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人肝细胞核因子12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人肝细胞核因子12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肝细胞核因子12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肝细胞核因子12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人肝细胞核因子12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人肝细胞核因子12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人肝细胞核因子12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人肝细胞核因子12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；