[发明专利]一种新的人核糖体亚基蛋白及其编码序列无效
申请号: | 00111779.3 | 申请日: | 2000-03-02 |
公开(公告)号: | CN1269407A | 公开(公告)日: | 2000-10-11 |
发明(设计)人: | 李能干;钱斌治;李月彬;肖华胜;陈竺;韩泽广 | 申请(专利权)人: | 国家人类基因组南方研究中心 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07K14/435;C07K16/18;C07H21/00;C12P21/00;C12Q1/68 |
代理公司: | 复旦大学专利事务所 | 代理人: | 陆飞 |
地址: | 201203 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核糖体 蛋白 及其 编码 序列 | ||
本发明涉及分子生物学、酶学、病理学以及基因工程等领域。具体地,本发明涉及一种在人类骨髓中表达的h50sRPL1蛋白及其核酸序列。本发明还涉及该蛋白和核酸序列的制备方法和用途。
核糖体是生物合成蛋白质的场所,由大小两个亚基组成。真核生物的核糖体亚基分别为60s与40s(s为高速离心时大分子物质的沉降系数单位,在一定程度上反映大分子的分子量和形状,常用来表示大分子物质的大小);而原核生物的分别为50s与30s。核糖体亚基由几种rRNA以及若干种核糖体亚基蛋白(ribosomal subunitprotein,RP)组成,各种核糖体亚基蛋白在蛋白质生物合成的过程中起着各自的作用。
本发明中,我们在人类骨髓中克隆到Thermus thermophilus 50sRPL1基因的同源基因h50sRPL1。
在本发明被公布之前,尚未有任何公开或报道过本专利申请中提及的人类h50sRPL1蛋白序列及其核酸序列。
本发明的第一目的就是提供一种新的人基因h50sRPL1(Genbank AccessionNo.AF212225),该基因是一个人h50sRPL1蛋白基因。
本发明的第二目的是提供一种新的人蛋白h50sRPL1。
本发明的第三目的是提供一种利用重组技术生产上述的新的人h50sRPL1蛋白和核酸序列的方法。
本发明还提供了这种人h50sRPL1蛋白多肽和编码序列的应用。
在本发明的一个方面,提供了一种分离出的DNA分子,该分子包括:编码具有人h50sRPL1蛋白质活性的多肽的核苷酸序列,所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.6中从核苷酸第100-1014位DNA分子的核苷酸序列有至少70%的同源性;或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.6中从核苷酸第100-1014位的核苷酸序列杂交。较佳地,所述的序列编码具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地,所述的序列具有SEQ ID NO.6中从核苷酸第100-1014位的核苷酸序列。
在本发明的另一方面,提供了一种分离出的人h50sRPL1蛋白质多肽,它包括:具有SEQ ID NO.7氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段,或其活性衍生物。较佳地,该多肽是具有SEQ ID NO.7序列的多肽。
在本发明的另一方面,还提供了一种载体,它包含上述的DNA分子。
在本发明的另一方面,还提供了一种用上述载体转化的宿主细胞。在一个实例中该宿主细胞是大肠杆菌;在另一实例中,该宿主细胞是真核细胞。
在本发明的另一方面,还提供了一种产生具有人h50sRPL1蛋白质活性的多肽的方法,其步骤如下:
(1)将编码具有人h50sRPL1蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列,形成人h50sRPL1蛋白表达载体,所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.6中从核苷酸第100-1014位的核苷酸序列有至少70%的同源性;
(2)将步骤(1)中的表达载体转入宿主细胞,形成人h50sRPL1蛋白的重组细胞;
(3)在适合表达人h50sRPL1蛋白多肽的条件下,培养步骤(2)中的重组细胞;
(4)分离出具有人h50sRPL1蛋白活性的多肽。
较佳地,在该方法中使用的核酸序列具有SEQ ID NO.6中第100-1014位的序列。
本发明还提供了与h50sRPL1蛋白多肽特异性结合的抗体。
在本发明中,“分离的”、“纯化的”或“基本纯的”DNA是指,该DNA或片段已从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来,还指该DNA或片段已经与天然状态下伴随核酸的组份分开,而且已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开。
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