[发明专利]一种新的多肽——人环管蛋白63和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人环管蛋白63，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞之间的相互通讯联系在多细胞的有机体中起着及其重要的作用。由于细胞间存在着精细的分工，一些细胞群体有赖于其他细胞群体，并要求其他细胞群体对其产生应答反应。这种精巧的细胞间通讯网络可以控制细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种其他的生命过程。

在许多种系生物的精子和卵子发育过程中，发育中的精子或卵子通过环管从其周围的细胞里得到营养物质。环管的形成与肌动蛋白纤维有关。现在已经知道有一些基因参与环管的组装和功能，其中一类是含有Kelch结构域的基因家族。Kelch蛋白家族都含有两个共同的结构，在N末段有BTB/POZ区域，在C末段有kelch重复序列[So1tysik-Espanola M et al,Mol biol Cell 1999 Jul]。

现在已经发现的kelch蛋白家族是肌动蛋白结合蛋白，或与肌动蛋白有关。Kelch蛋白家族在环管形成、神经纤维定位、细胞融合、细胞形态形成等在发育过程中与细胞骨架有关的生理过程中起重要作用[Soltysik-espanola M,Mol biol Cell1999；Philips J,J Cell biol 1998；]。例如，在果蝇中，kelch蛋白被定位在环管的内侧面，它使环管侧面保持紧束的状态。Kelch蛋白突变会造成卵子周围的护卫滋养细胞通过环管向卵子输送胞质这一过程受到阻碍[Xue F,Cooley L,Cell 1993Mar 12]。Kel-1蛋白的缺失会导致幼虫早期的生长停滞[Ohmachi M,genes Cells1999]。由于在包括人在内的许多生物的精子、卵子形成过程中都发现了环管结构和具有kelch结构的蛋白，因此可以认为kelch蛋白对精卵形成的作用具有普遍意义。又如在脑内发现的kelch蛋白Mayven可能在脑细胞肌动蛋白细胞骨架的动态组织中起作用[Soltysik-Espanola M,Mol Biol Cell 1999]。

本发明的人的基因与果蝇kelch蛋白在蛋白水平上有75％的同源性，87％的同一性。其与kelch蛋白家族的特征性结构域---kelch结构域非常相似，且含有kelch结构域中的几个高度保守的氨基酸残基。基于以上各点，故认为本发明的新基因为一编码人与kelch蛋白家族kelch结构域相似的基因，命名为人环管蛋白63。并以此推断其与kelch结构域相似，具有相似的生物学功能。

由于如上所述人环管蛋白63蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人环管蛋白63蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人环管蛋白63蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人环管蛋白63以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人环管蛋白63的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人环管蛋白63的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人环管蛋白63的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人环管蛋白63的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人环管蛋白63的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人环管蛋白63异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少76％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中45-1772位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2873位的序列。