[发明专利]一种新的多肽——人GM2激活蛋白14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽一一人GM2激活蛋白14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

GM2激活蛋白是一种存在于溶酶体中的分泌蛋白，其与溶酶体中其它分泌蛋白相似，参与相关细胞内物质的溶解与转运，主要负责转运各种脂类分子，如糖脂、神经节苷脂及乙酰甘油磷酸等。同时，该蛋白还在一些蛋白的代谢过程中亦起着重要的调节作用，如在GM2神经节苷脂的水解过程中，GM2激活蛋白与溶酶体β-氨基己糖酶A协同作用，以促进溶酶体β-氨基己糖酶A的催化活性，催化GalNAc、NeuAc从GM2上水解下来，以完成GM2神经节苷脂在体内的降解[CarmenBertoni,Yu-TehLi et al.,1999,J Biol Chem,274:28612-28618]。

在人的组织中存在着两种主要的溶酶体氨基己糖酶(Hex)异构体--由不同亚单位构成的杂二聚体HexA和同型二聚体HexB。研究发现，这两种蛋白的表达异常通常与生物体内一些神经系统疾病的发生密切相关，其中HexA必需在有GM2激活蛋白的存在下才具有催化活性。临床实验的研究表明，HexA酶在生物体内催化GM2神经节苷脂水解反应的进行，而其催化活性的激活必需有溶酶体内GM2激活蛋白的存在，GM2激活蛋白在此过程中作为一种协同作用因子，以增加HexA酶的催化活性。GM2的水解是生物体内一个重要的生理过程，GM2蛋白在中枢神经系统及脑中的过度积聚，将引发常见的家族性黑蒙性白痴及一些神经系统疾病。HexA及GM2激活蛋白中的任意一者的缺失或表达异常都将影响GM2蛋白在生物体内的水解。

由上可知，HexA与GM2激活蛋白在脑及神经系统的一些代谢途径中起着极为重要的调节作用，调控着一些重要蛋白如GM2神经节苷脂等的水解过程。GM2激活蛋白在此过程中与底物蛋白结合，促进氨基己糖酶A形成催化活性构型，以催化蛋白水解过程的进行。其表达异常将导致氨基己糖酶A的失活或功能异常，从而影响GM2蛋白在体内的水解，而该蛋白在相关组织的积聚将引发各种相关的疾病。GM2激活蛋白在体内通常与一些神经系统发育紊乱性疾病及一些相关的家族遗传性疾病，如泰-萨二氏病等的发生密切相关[Jeffrey A.Yuziuk,CarmenBertoni et al.,1998,J Biol Chem,273:66-72]。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株以及未饥饿的L02细胞株中，本发明的多肽的表达谱与人GM2激活蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人GM2激活蛋白14。

由于如上所述人GM2激活蛋白14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人GM2激活蛋白14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人GM2激活蛋白14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人GM2激活蛋白14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人GM2激活蛋白14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人GM2激活蛋白14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人GM2激活蛋白14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人GM2激活蛋白14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人GM2激活蛋白14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人GM2激活蛋白14异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SBQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。