[发明专利]一种新的多肽——甲酰胺基嘧啶－DNA糖基化酶37和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

DNA是遗传信息的载体，它需要极高的保真度，这不仅有赖于复制体系的完善，而且还需要有能够纠正已存在的错误这样一类修复体系。在长期的进化中，生物体演化出能纠正偶然的复制错误的系统以及能修复环境因素和体内化学物质造成的DNA分子的损伤的系统。在DNA分子中，除了尿嘧啶能够在DNA复制时渗入以外，胞嘧啶也能自发的脱氨氧化成为尿嘧啶。腺嘌呤也可以脱氨氧化生成次黄嘌呤。此外，还有其他的碱基衍生物会存在于DNA链中，例如2,6-二氨基-4-羟基-5N-甲基甲酰氨基嘧啶(Fapy)以及7,8-二氢-8-氧代鸟嘌呤(8-OxoG)等，均已发现其相应的DNA糖基化酶。DNA糖基化酶广泛存在与几乎所有的生物体内。根据他们是否具有内在的AP内切酶活性，可以将DNA糖基化酶分为两类：不具AP内切酶活性与具AP内切酶活性。

甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶(Fapy-DNA糖基化酶)属于第二种DNA糖基化酶，是一种参与DNA修复的酶类，它切除氧化嘌呤碱基从而释放2,6-二氨基-4-羟基-5N-甲基甲酰氨基嘧啶(Fapy)以及7,8-二氢-8-氧代鸟嘌呤(8-OxoG)残基。FPG除了具有糖基化酶活性之外，还能够在五嘌呤嘧啶位点(AP位点)内切去DNA。FPG是一种单体蛋白质，分子量约为32Kd，其活性形式要求与锌结合。锌结合位点位于蛋白的C-端部分，其中含有四个保守且重要的半胱氨酸，是锌配体，该段保守的特征序列模板为：C-x(2,4)-C-x-[GTAQ]-x-[Ⅳ]-x(7)-R-[GSTAN]-[STA]-x-[FYI]-C-x(2)-C-Q。甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶对于生物体的生存十分重要。如果这些酶的基因发生突变，人的身体状况将会很差，会染上各种癌肿等疾病。甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶的修复机制和尿嘧啶糖基化酶相同。

本发明的多肽含有上述的保守特征序列模板，该多肽及其激动剂抑制剂拮抗剂，可用于诊断兼防治由DNA复制错误而引起的癌症等疾病。

由于如上所述甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与甲酰胺基嘧啶-DNA糖基化酶37异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中48-1046位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2114位的序列。