[发明专利]一种新的多肽——人DNA错配修复基因蛋白11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人DNA错配修复基因蛋白11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

DNA的转录复制及遗传物质的重组是生物体细胞繁衍及进化的第一个重要步骤，在DNA的复制与重组过程中往往会发生各种错误，如DNA碱基的错配及碱基丢失等，而生物体内亦存在着相应的修复机制以完成对错配碱基的修复过程。研究显示，无论在原核生物还是真核生物中均存在着相应的碱基修复系统，这一修复系统由多种mut基因(如MutH、MutL、MutS与MutU)及各种单链DNA结合蛋白(如核酸外切酶Ⅰ、核酸外切酶Ⅶ、RecJ核酸外切酶、DNA多聚酶Ⅲ全酶和DNA连接酶)共同参与完成。其中各种不同的蛋白在此过程中发挥着特定的作用，如MutS蛋白在此过程中负责识别及与错配碱基结合，形成MutS-DNA复合物；MutL则与MutS-DNA复合物相互作用；而MutH则与半甲基化GATC位点上的未甲基化位点结合，以催化DNA错配碱基的修复。

人们早已从细菌体内克隆得到了DNA错配修复基因MutS，后又从多种原核及真核生物体内克隆得到了多种不同来源的与MutS同源的蛋白，这些蛋白高度的同源性暗示着DNA错配修复系统在进化上亦是高度保守的，这些蛋白构成了一很大的蛋白家族，即MutS蛋白超家族。1992年，Reenan等人从酿酒酵母中克隆得到了各种MutS同源的蛋白，在酿酒酵母中约存在至少五种MutS蛋白的同源蛋白MSH，各种不同的MSH蛋白均在生物体的不同组织中涉及DNA错配碱基的修复工作，且其DNA修复机制比原核生物中复杂的多；1993年，Fishel等人又从人中克隆得到的hMSH2蛋白，该蛋白与酿酒酵母的MSH2蛋白极为相似，其功能异常将导致细胞内错配碱基修复的失败，与人体内的遗传性结肠息肉肿瘤等癌症的发生相关；1996年，Watanabe等人从人中克隆得到了一MSH3基因，该基因编码的蛋白与细菌的MutS蛋白有较高的同源性，为真核生物MutS蛋白超家族中的又一新成员，其在生物体所有的组织中均有表达，该蛋白的突变或表达异常亦与生物体内血液系统相关的恶性肿瘤、白血病及遗传性疾病等的发生均密切相关[Atsushi Watanabe,Miyoko Ikejima et al.,1996,Genomics,31:311-318]。

由上可知，人们已克隆得到了真核生物MutS蛋白超家族中的多种不同的成员，这些成员均在DNA错配碱基修复过程中起重要的作用。这些蛋白的突变或表达异常，通常将导致生物体内相关组织DNA错配修复的失败，从而引发各种相关的疾病。这些蛋白在生物体内通常与相关组织的肿瘤及癌症、血液系统相关的恶性肿瘤、白血病及相关的遗传性疾病如遗传性结肠息肉癌等的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与人DNA错配修复基因蛋白MSH3的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人DNA错配修复基因蛋白11。

由于如上所述人DNA错配修复基因蛋白11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人DNA错配修复基因蛋白11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人DNA错配修复基因蛋白11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人DNA错配修复基因蛋白11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA错配修复基因蛋白11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA错配修复基因蛋白11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人DNA错配修复基因蛋白11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人DNA错配修复基因蛋白11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人DNA错配修复基因蛋白11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。