[发明专利]一种新的多肽——人白细胞介素增强结合因子1－12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人白细胞介素增强结合因子1-12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人免疫缺陷型病毒基因及细胞内基因表达的调控依赖于细胞转录因子及T细胞活化激活的各种因子(如NF-KB及活性T细胞核因子)等的作用。在各种免疫缺陷型病毒、人T细胞白细胞病毒及白细胞介素2等病毒的蛋白序列中，均含有一长末端重复序列，其中含有两个富含脯氨酸的结构域，该结构域是病毒与各种调控因子结合，以调控其表达的中心活性区域。研究发现，生物体内还存在着一类蛋白，为白细胞介素结合因子，该类蛋白在生物体内特异的与一些免疫缺陷型病毒及白细胞介素基因的富含脯氨酸的结构域结合，以调控这些基因的转录与表达[Ching Li,Aldons J.Lusis et al.,1992,Genomics,13:665-671]。

1991年，Ching Li等人即从人中克隆得到了一白细胞介素结合蛋白，该蛋白的DNA结合结构域与果蝇肝素核因子蛋白家族的特征性结构域---fork headDNA结合结构域有较高的同源性。该结构域是蛋白与DNA结合，调控各种相关基因转录与表达的活性作用中心。在白细胞介素结合蛋白的蛋白序列中还含有核苷酸结合位点、N-糖基化结构域、泛素介导的核酸降解信号片段及一潜在的核定位信号片段等多个功能性结构域。这些功能域在蛋白作用过程中协同作用，以正负调控着各种相关基因的转录与表达。该蛋白的突变或表达异常将影响相关基因在体内的表达，从而引发各种相关的疾病[Ching Li,Chingfeng Lai etal.,1991,Prog.Natl.Acid.Sci.USA,88:7739-7743]。

众所周知，白细胞介素在生物体自身免疫过程中其中重要的调节作用，其在体内激活各种相关的T细胞及B细胞等的作用活性，以清除各种外来有害物质。而白细胞介素结合因子则在生物体内调控各种相关白细胞介素的转录与表达。其作为一种正负调节因子，当生物体需要开启自身免疫机制时，即促进各种白细胞介素的转录与表达；而当生物体不需要自身免疫时，则抑制相关基因的转录与表达。由此可知，白细胞介素结合蛋白在生物体的免疫系统中起着极为重要的调控作用，其突变或表达异常将直接影响生物体免疫系统的正常功能，进而引发各种相关的疾病。该蛋白在生物体内通常与各种、免疫缺陷型疾病、免疫系统紊乱性疾病、各类炎症反应、相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。该蛋白还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与人白细胞介素增强结合因子1的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人白细胞介素增强结合因子1-12。

由于如上所述人白细胞介素增强结合因子1-12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人白细胞介素增强结合因子1-12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人白细胞介素增强结合因子1-12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人白细胞介素增强结合因子1-12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人白细胞介素增强结合因子1-12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人白细胞介素增强结合因子1-12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人白细胞介素增强结合因子1-12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人白细胞介素增强结合因子1-12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人白细胞介素增强结合因子1-12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人白细胞介素增强结合因子1-12异常相关的疾病的方法。