[发明专利]一种新的多肽——人热休克蛋白15和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人热休克蛋白15，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在一些生物，例如果蝇、酵母和一部分培养的HeLa细胞株中，当环境温度升高时，会合成一些特殊的蛋白。例如将HeLa细胞株的环境温度提高到45℃时10分钟时，至少有三组蛋白质的合成将会提高。【Europ.J.Biochem.117:341-346,1981.】这种合成可以被放线菌素D所抑制，说明合成是受到转录调控的。这种蛋白被称为热休克蛋白。当细胞受到其他的不利于新陈代谢的环境压力时，例如辐射、有毒的金属离子等，也会表达此类蛋白。因此，这种蛋白又被称为压力蛋白(stress protein)。热休克蛋白对维持细胞的整体性是非常重要的。在人类的基因组中也发现了类似的序列。通过对人的热休克蛋白HSP70的分析发现，在唐氏综合症中(Down syndrome)，HSP70蛋白的表达增高。有两个热休克基因定位于补体系统的其他组成成分，补体活化调节因子中。【Genomics 12:74-79,1992】还有可以HSP70基因位于Ⅲ类主要组织相关性复合物(MHC)的基因区域中，是与MHC相关的。

许多的代谢失衡和机体受伤，例如中风，神经退化症，癫痫和外伤都会导致热休克蛋白的表达，其中最大量的是HSP70。超表达HSP70蛋白可以保护细胞不受这类失常的损伤。说明热休克蛋白的表达是一种细胞的保护机制。【MolecularMedicine Today,1999,5:12:525-531】

有证据表明HSP70蛋白在许多种癌症中表达，对预后以及抗药性有一定的作用。【Onkologie 1999,22:3:236-239】

细胞因子和原癌基因的mRNA在3’非翻译区的富含AU的部分经常很快的降解。这种降解与结合富含AU序列的结合蛋白AUF1有关。AUF1与热休克蛋白HSC70和HSP70，翻译起始因子EIF4G以及poly(A)结合蛋白形成复合物。首先EIF4G同AUF1解离，接着AUF1遍在蛋白化，之后AUF1被蛋白酶体降解。热休克时产生的HSP70蛋白，泛素-蛋白酶体网络的负调控，以及便在蛋白化酶E1的失活都会阻碍富含AU的mRNA和AUF1的降解。这些结果将细胞因子mRNA的快速降解与泛素-蛋白酶体途径结合起来。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv 304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与人MHC相关的HSP70蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人热休克蛋白15。

由于如上所述人热休克蛋白15蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人热休克蛋白15蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人热休克蛋白15蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人热休克蛋白15以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人热休克蛋白15的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人热休克蛋白15的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人热休克蛋白15的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人热休克蛋白15的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人热休克蛋白15的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人热休克蛋白15异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含:具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。