[发明专利]一种新的多肽——人受体相关的蛋白酪氨酸磷酸酶11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人受体相关的蛋白酪氨酸磷酸酶11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

蛋白酪氨酸磷酸化是生物体内细胞信号传导的一个重要机制，通常由蛋白酪氨酸激酶和蛋白酪氨酸磷酸酶来共同调控完成。目前，对蛋白酪氨酸激酶的研究较为详细，而对蛋白酪氨酸磷酸酶的研究相对较少些。研究发现，生物体内存在着两类不同的蛋白酪氨酸磷酸酶：可溶性胞液酶和膜结合酶。这两种磷酸酶在生物体内具有相似的功能，只是作用的位点不同[Jones S.W.,Erikson R.L.etal.,1989,J Biol.Chem.,264:7747-7753]。蛋白酪氨酸激酶与蛋白酪氨酸磷酸酶在生物体内协同作用，蛋白酪氨酸激酶的失活将导致细胞信号传导途径的异常，即细胞的异常增殖与原癌基因的变形、恶化，而蛋白酪氨酸磷酸酶作为蛋白酪氨酸激酶的拮抗剂，是一种肿瘤抑制基因，抑制着该过程的进行。该磷酸酶的突变或失活将导致原癌基因的变形，即导致生物体内各种肿瘤及癌症等疾病的发生。

人们已从各种不同的生物体内得到了多种不同的蛋白酪氨酸磷酸酶。1989年，Charbonneau等人从人胎盘组织克隆得到了一胞液蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)，并对其一级结构进行了研究，发现其胞质区域与两种人糖蛋白--白细胞抗体及白细胞抗体相关分子均有较高的同源性，且两者在体内具有相似的生物学活性[Charbonneau H.,Tonks N.K.et al.,1989,Prog.Natl.Acad.Sci.USA,86:5252-5256]；同年，Streuli等人又从果蝇胚胎组织中克隆得到了两个受体相关的蛋白酪氨酸磷酸酶(DLAR与DPTP)，这两个酪氨酸磷酸酶与人的PTP1B具有相似的结构特征及具有相似的生物学功能[Streuli M.,Krueger N.X.etal.,1989,Prog.Natl.Acad.Sci.USA,86:8698-8702]；1990年，Neil等人从人体内又克隆得到了六种新的蛋白酪氨酸磷酸酶，分别为HPTPα、β、γ、δ、ε及ζ。其中，HPTPε与上述人PTP1B蛋白及果蝇DLAR及DPTP蛋白具有相似的结构与生物学活性，均与体内发育紊乱性疾病、相关组织肿瘤及癌症等疾病的发生相关[Neil X.Krueger,Michel Streuli et al.,1990,The EMBOJournal,9:3241-3252]。

研究发现，上述各种受体相关的蛋白酪氨酸磷酸酶均具有相似的结构特征，其蛋白序列中均含有一很大的细胞外区域、一跨膜肽链及两个胞液内蛋白酪氨酸磷酸酶结构域；细胞外区域又由两个Ig结构域和两个FN-Ⅲ结构组成，这两个结构域在细胞连接过程中发挥重要的作用；这些蛋白胞液内两个结构域亦在蛋白的作用活性过程中起重要的作用，其中结构域Ⅰ是酶的催化活性中心，而结构域Ⅱ在酶催化活性作用过程中起着重要的调控作用。另外，所有的蛋白酪氨酸磷酸酶的蛋白序列中均含有一高度保守的序列片段：VHCSAGVGRTG；该保守的序列片段亦是酶发挥其催化活性的中心区域。这些酶组成结构域在蛋白作用过程中协同作用，尤其是酶活性中心结构域决定着酶在生物体内的作用活性。这些特殊位点的突变或表达异常将导致蛋白的功能异常，如磷酸酶的失活，从而引发各种相关的疾病[Streuli M.,Krueger N.X.et al.,1990,EMBO J.,9:2399-2407]。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与人蛋白酪氨酸磷酸酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人受体相关的蛋白酪氨酸磷酸酶11。

由于如上所述人受体相关的蛋白酪氨酸磷酸酶11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人受体相关的蛋白酪氨酸磷酸酶11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人受体相关的蛋白酪氨酸磷酸酶11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人受体相关的蛋白酪氨酸磷酸酶11以及其片段、类似物和衍生物。