[发明专利]一种新的多肽——人肌动蛋白14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人肌动蛋白14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

肌动蛋白在细胞结构、细胞运动及肌肉细胞与非肌肉细胞的收缩力形成过程中都起着重要的作用。在很多器官中均发现有肌动蛋白及肌动蛋白异构体存在。虽然这些肌动蛋白氨基酸序列非常相似，但均是由不同基因产生的不同的蛋白产物[Peter A.Rubenstein,BioEs say,1990,12:309-315]。

在脊髓动物中含有三种肌动蛋白异构体：α、β及γ。α肌动蛋白在肌肉组织中发现，其在肌肉收缩中起重要作用；β及γ肌动蛋白在众多细胞中均有表达，如作为细胞骨架的组成成分及细胞内运动的中介物。肌动蛋白不仅在肌肉收缩力的形成过程中起重要作用，其在非肌肉细胞的生理过程中亦起着重要的作用，如：胞质环流、细胞形态形成及细胞壁沉积等。

不同的肌动蛋白异构体有着明显的组织特异性表达，这表明这些蛋白在不同的组织中均有着重要的生理学功能。在肌肉细胞中，它们与线粒体及神经肌肉接头的结构及功能特异相关。这些蛋白还与微血管外膜细胞及肠上皮细胞的各种生理学功能相关[Rubenstein P.A.,BioEssay,1990,12:309-315]。因而，这些蛋白在生物体内的表达异常将导致上述器官及细胞的功能异常，从而引发各种与之相关的上述组织的疾病。

肌动蛋白或以单体形式存在或以多聚体形式存在。每一肌动蛋白单体均可结合一分子的ATP，在蛋白聚合时，ATP被水解，以提供蛋白作用所需的能量。肌动蛋白通常含有以下三个保守的一致性序列，序列1:[FY]-[LIV]-G-[DE]-E-A-Q-X-[RKQ](2)-G；序列 2:W-[IV]-[STA]-[RK]-X-[DE]-Y-[DNE]-[DE]及序列 3:[LM]-[LIVM]-T-E-[GAPQ]-X-[LIVMFYWHQ]-N-[PSTAQ]-X(2)-N-[KR]。前两个保守序列对于所有的肌动蛋白是特异的，而第三个保守序列在肌动蛋白及肌动蛋白相似的蛋白中均存在。这些保守的序列片段为蛋白发挥生理学功能的作用位点。这三个序列片段中某些特殊位点的突变将导致蛋白功能的异常，从而引发各种相关组织的疾病，如微血管系统疾病、肠道组织疾病及一些与运动系统相关的疾病。

本发明的新的人蛋白，亦含有肌动蛋白家族的两个保守的序列片段，其为人肌动蛋白家族的新成员，且与该家族的其他成员相似，具有相似的生物学功能，其表达异常可能与一些微血管系统的疾病、肠道组织疾病及一些运动系统相关的疾病的发生有关。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与人肌动蛋白41的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人肌动蛋白14。

由于如上所述人肌动蛋白14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人肌动蛋白14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人肌动蛋白14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人肌动蛋白14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肌动蛋白14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肌动蛋白14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人肌动蛋白14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人肌动蛋白14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人肌动蛋白14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人肌动蛋白14异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：