[发明专利]一种新的多肽——人兴奋型氨基酸转运器17和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人兴奋型氨基酸转运器17，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

从细胞外环境中摄取酸性氨基酸如谷氨酸和天门冬氨酸是由钠依赖的高亲和力转运系统来实现的。这种转运系统存在于机体的外周组织(Christensen,1990)和神经系统(Kanner and Schuldiner,1987；Nicholls and Attuell,1990)中。在哺乳动物中，一个能够介导细胞外酸性氨基酸和中性氨基酸摄取的基因家族已经通过基因克隆的方法得到(Amara and Arriza,1993；Kanner,1993；Kanai et al.,1993)，称为谷氨酸转运器基因家族。对该家族中的蛋白进行序列对比，发现在很多区域上氨基酸序列都是保守的，尤其是一些重要的功能区段以及结构区域，但是在其N-末端和C-末端存在序列上和长度上较大的不同。

在调节细胞外谷氨酸浓度中重摄取起着非常重要的作用。在人的运动皮层中有三种谷氨酸转运器，分别为EAAT1、EAAT2和EAAT3，通过分子克隆和功能表达的方法找到了它们的一些特性。每种EAAT亚型的mRNA都存在于脑中，在小脑中EAAT1的表达占优势。此外，EAAT1和EAAT3的mRNA还能在不同的非神经组织中找到，而且在在心脏和肌肉组织中与脑中一样强烈，在胎盘和肺中也比较明显；EAAT3的mRNA在肾中大量表达，而在脑中的表达量反而低；EAAT2的表达只限于在脑中(Kanai andHediger,1992)。EAAT的二级结构含有较多的β-折叠和较少的α-螺旋结构。

酸性氨基酸如谷氨酸在细胞膜上的转位包括了底物的结合以及转运过程，但是这个过程是和Na离子相耦联的(Balear and Johnston,1972)。除了谷氨酸接受器的激活作用，兴奋型氨基酸以及它们的高亲和力摄取系统类似物之间的相互作用对于它们的神经毒性有着决定意义(choi et al.,1987；ROSEnberg et al.,1992)。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与兴奋型氨基酸转运器的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人兴奋型氨基酸转运器17。

由于如上所述人兴奋型氨基酸转运器17蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人兴奋型氨基酸转运器17蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人兴奋型氨基酸转运器17蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人兴奋型氨基酸转运器17以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人兴奋型氨基酸转运器17的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人兴奋型氨基酸转运器17的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人兴奋型氨基酸转运器17的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人兴奋型氨基酸转运器17的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人兴奋型氨基酸转运器17的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人兴奋型氨基酸转运器17异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中1263-1721位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2975位的序列。