[发明专利]一种新的多肽——短链脱氢酶/还原酶14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——短链脱氢酶/还原酶14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

短链脱氢酶/还原酶(SDR)家族是一个很大的家族，包含了为数众多的酶，它们中绝大多数是依赖辅酶Ⅰ(NAD)或辅酶Ⅱ(NADP)的氧化还原酶，参与呼吸代谢过程。这种酶最早是从果蝇的乙醇氧化酶中得到，广泛存在于哺乳动物、细菌、真菌以及植物中。这个家族的蛋白大多数含250-300个氨基酸残基，较为保守的区域是：[LIVSPADNK]-x(12)-Y-[PSTAGNCV]-[STAGNQCIVM]-[STAGC]-K-{PC}-[SAGFR]-[LIVMSTAGD]-x(2)-[LIVMFYW]-x(3)-[LIVMFYWGAPTHQ]-[GSACQRHM]，其中包括两个最为保守的残基：Tyr和Lys,Tyr参与催化反应机制。多数短链脱氢酶/还原酶是以二聚物或四聚物的形式存在，主要的亚单位接触区域形成两条长的α-螺旋结构(αE,αF)，明显地加强了亚单位之间的相互作用。

对短链脱氢酶/还原酶(SDR)家族的诸多酶进行比较，氨基酸残基的相同水平约15-30％，表明它们有相同的起源但在进化过程中产生了很大的分歧，只有Tyr和Lys残基保留了下来，这两个残基催化反应结构域的形成过程中起着关键性的作用，酶分子的N-末端是结合辅酶(NAD(H)和DADP(H))的部位，通常含有Gly-X-X-X-Gly-X-Gly序列。在这个家族为数不多的保守氨基酸残基中，Gly占据了1/3-1/2。由于各种酶的底物特异性各不相同，活性位点和反应机制也并不完全相同。较为典型的短链脱氢酶，如NAD依赖的15-羟基前列腺脱氢酶，它的变化能调节前列腺素浓度的改变；NAD依赖的17β-羟甾醇脱氢酶能使17β-甾二醇转变为甾酮，与人的子宫内膜癌和胸腺癌的形成有关。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与短链脱氢酶/还原酶12的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为短链脱氢酶/还原酶14。

由于如上所述短链脱氢酶/还原酶14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的短链脱氢酶/还原酶14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新短链脱氢酶/还原酶14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——短链脱氢酶/还原酶14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码短链脱氢酶/还原酶14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码短链脱氢酶/还原酶14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产短链脱氢酶/还原酶14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——短链脱氢酶/还原酶14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——短链脱氢酶/还原酶14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与短链脱氢酶/还原酶14异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中109-486位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2008位的序列。