[发明专利]一种新的多肽——前列腺特异性膜抗原16和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——前列腺特异性膜抗原16，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

器官特异性抗原能“发现”只发生于一个特异性组织的反应。前列腺是一个非常不一般的器官，随着年龄的增加大多数器官会发生萎缩，而前列腺腺体却一直增大，在大多数病例中最终发展为恶性肿瘤。

前列腺癌是男性中最常见的恶性肿瘤疾病，在导致男性死亡的癌症中位居第二[Chiarodo,A.(1991)Cancer Res.,51:2498-2505]。前列腺癌有很多种不同的表现形式，从慢慢地产生到无痛地恶化，再到发展为不应转移性疾病，最后向骨转移。PAP是最早发现的诊断前列腺癌转移扩散的免疫血清之一，现在则用PSA代替。PSA与肿瘤有关，是癌细胞转移的指示剂，并且为前列腺癌病人手术、放射以及男性激素消融治疗提供参数。所有这些蛋白质都分泌在血清和前列腺中并且可以测出。来源于一个有荷尔蒙不应前列腺癌的前期治疗病人的转移性淋巴结LNCaP人前列腺癌细胞系已经建立起来[Horoszewicz,J.S.,Leong,S.S.,etal.,(1983)Cancer Res.,43∶1809-1818]。该细胞系被认为是研究体内前列腺癌细胞的最好模型，因为它有男性染色体核型的非整倍体，保持了前列腺的分化功能，而该功能又能产生PAP和PSA并且高表达的男性激素受体。从该细胞系中分离出的细胞膜去免疫小鼠产生杂交瘤。用小鼠的脾细胞和LNCaP细胞膜免疫能产生一个前列腺特异性单克隆抗体，命名为7E11-C5。该单克隆抗体与LNCaP细胞膜结合非常紧密。所有良性和赘生前列腺细胞都表现阳性，而恶性肿瘤则表现更多的阳性。淋巴结和骨转移也对该抗体表现阳性，尤其在荷尔蒙-不应损伤中有高表达[Axelrod,H.R.,Gilman,S.C.,et al.,(1992)AUA Proceedings.Abstract596,1992]。

7E11-C5的抗原决定簇包括一个抗原的一个糖类部分，这个抗原的分子量大约是100,000kDa[Abdel-Nabi,H.,Wright,G.L.,etal.,(1992)Semin.Urol.,10:45-54]。我们把该抗原叫做前列腺特异性膜抗原PSM。

PSM抗原呈现出许多有趣而有意义的特征。位于跨膜区域N末端的3个精氨酸残基表明该蛋白属于类型Ⅱ整合膜蛋白，还有一个短的N末端区域位于膜的细胞质侧，一个大的C末端结构域位于分子外侧[vonHeijine,G.Biochim.Biophys.Acta,947:307-333,1988]。作为唯一的前列腺上皮细胞的整合膜蛋白，PSM抗原或其一部分可以作为观察转移堆积的理想位点。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与前列腺特异性膜抗原的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为前列腺特异性膜抗原16。

由于如上所述前列腺特异性膜抗原16蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的前列腺特异性膜抗原16蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新前列腺特异性膜抗原16蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——前列腺特异性膜抗原16以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码前列腺特异性膜抗原16的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码前列腺特异性膜抗原16的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产前列腺特异性膜抗原16的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——前列腺特异性膜抗原16的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——前列腺特异性膜抗原16的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与前列腺特异性膜抗原16异常相关的疾病的方法。