[发明专利]一种新的多肽——人DNA错配修复基因蛋白10和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人DNA错配修复蛋白10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

DNA聚合酶偶尔能催化不能与模板形成氢键的错误碱基的掺入。这种复制错误通常由DNA聚合酶3’--5’的校对功能立即进行纠正，然后才开始下一个核苷酸的聚合反应。然而在某些特殊条件下，DNA聚合酶将极少数的错误碱基遗留在DNA链上而没有进行纠正。据估计，这种错误的频率为10^-8。然而，人们实际测量到的突变频率为10^-10或10^-11。由于DNA的完整性和精确性是生命的根本所在，因而细胞中演化出另一个修复系统，叫做错配修复系统，给予第二次纠正错误的机会。(Modrich P.Annu.Rev.Biochem.56:435-466(1987))

腺嘌呤的甲基化则是错配修复的识别标志，根据甲基化带来的特征，错配修复系统就可以识别出模板链和新生链，从而纠正新生上的不配对碱基，保证了高度的精确性和完整性。

DNA错配修复蛋白是错配修复系统中重要的组成蛋白，DNA错配修复蛋白在很多生物体内都有存在，例如，大肠杆菌的mutL蛋白；链球菌的hexB蛋白；酵母的PMS1和MLH1蛋白；人的MLH1(MutL homologue-1)蛋白等等。

所有的DNA错配修复蛋白均含有一保守的区域，该区域含有以下一致的序列片段：G-F-R-G-E-A-L，在众多不同生物的DNA错配修复蛋白中均含有这一序列片段，这一结构基序在蛋白发挥正常生理学功能的过程中起着极为重要的作用。对酵母的DNA错配修复蛋白研究的结果显示，Pro640如果变为Leu则会造成蛋白功能的完全失去。DNA错配修复蛋白具体的结构及其与功能的关系请参阅相关文献。(Gene 1998 Jun 15；213(1-2):159-67)

根据已有的研究，如果编码人DNA错配修复蛋白的基因发生突变，则会导致可遗传的non-polyposis colorectal cancer(HNPCC)。(Gene 1998 Jun15；213(1-2):159-67)

最近的研究结果显示，DNA错配修复蛋白(DNA mismatch repair protein MMR)与一种新的人核酸外切酶有很强的相互作用，我们可以推测，DNA修复蛋白是与很多蛋白结合在一起对DNA的修复起作用的。(Cancer Res 1998 Oct15；58(20):4537-42)

也有研究表明，DNA错配修复蛋白在细胞周期过程中，对于DNA复制中可能出现的错误碱基的掺入有着重要的修复作用，从而保证了细胞有丝分裂过程遗传的忠实性。(Cancer Res 1998 Feb 15；58(4):767-78)

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv 304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人DNA错配修复蛋白11的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人DNA错配修复蛋白10。

由于如上所述人DNA错配修复蛋白10蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人DNA错配修复蛋白10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人DNA错配修复蛋白10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人DNA错配修复蛋白10以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA错配修复蛋白10的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA错配修复蛋白10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人DNA错配修复蛋白10的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人DNA错配修复蛋白10的抗体。