[发明专利]一种新的多肽——人葡萄糖转运相似蛋白18和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人葡萄糖转运相似蛋白18，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

编码表达于人类红细胞和肝癌细胞系(HepG2)以及同类鼠脑蛋白易化葡萄糖转运蛋白的cDNA已经被生物学家分离出并分析了其特征[Mueckler,M.,Caruso,C.,Baldwin,S.A.,Panico et al.,(1985)Science229,941-851][Birnbaum,M.J..,Haspel,H.C.,etal.,(1986)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.83,5784-5788]。RNA杂交实验发现编码葡萄糖转运蛋白的mRNA出现在许多成年组织中，这表明该葡萄糖转运蛋白负责部分组织对葡萄糖的吸收。然而这种葡萄糖转运蛋白的mRNA水平在骨骼肌中非常低，而骨骼肌是葡萄糖吸收和利用最多的地方[DeFronzo,R.A.(1988)Diabetes37,667-687]。因此，必定有一个在结构上相似的负责哺乳动物葡萄糖转运的蛋白家族，正象有一个大肠杆菌负责糖类和营养吸收的相关家族一样[Maiden,M.C.J.,Dayis,E.O.,et al.,(1987)Nature 325,641-643]。生物学家克隆出了这个与葡萄糖转运蛋白相似的人类葡萄糖转运相似蛋白家族中的一些蛋白。

在人类骨骼肌中担任葡萄糖转运任务的葡萄糖转运相似蛋白cDNA全长3908bp(除去poly(A)尾巴)，包含有一个长的从第四个ATG开始的开放阅读框，这表明这个有496个氨基酸的蛋白与人类红细胞/HepG2以及肝转运蛋白各有64.4％和51.6％的相同性。葡萄糖转运相似蛋白有一个与HepG2葡萄糖转运蛋白相似的结构，该结构包括12个转膜片段(TM1-12)以及一个TM1和TM2之间的分子外环(包含糖基化位点，Asn-43)和一个亲水的TM6和TM7之间的分子内环。

葡萄糖转运相似蛋白家族成员之间有大约50％的相同性，都有相似的包括12个疏水可能是跨膜区域的氨基酸结构。家族蛋白各成员之间主要的区别是序列长度和位于TM1和TM2之间的分子外环以及位于C末端的分子内环。这两个区域可能与功能特异性有关。

编码编码葡萄糖转运相似蛋白家族蛋白的基因并不是集中在一起，而是分散在这个基因组中。本文所描述的葡萄糖转运相似蛋白位于染色体12。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与人葡萄糖转运相似蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人葡萄糖转运相似蛋白18。

由于如上所述人葡萄糖转运相似蛋白18蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人葡萄糖转运相似蛋白18蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人葡萄糖转运相似蛋白18蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人葡萄糖转运相似蛋白18以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人葡萄糖转运相似蛋白18的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人葡萄糖转运相似蛋白18的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人葡萄糖转运相似蛋白18的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人葡萄糖转运相似蛋白18的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人葡萄糖转运相似蛋白18的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人葡萄糖转运相似蛋白18异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：