[发明专利]一种新的多肽——人锌指蛋白10和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人锌指蛋白10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

锌指蛋白是一种DNA结合蛋白，最早在非洲爪蟾RNA聚合酶Ⅲ介导的5S rRNA基因转录因子TFⅢA蛋白的氨基酸序列中发现。此后发现锌指蛋白在不同生物的各种组织中均有表达，这些组织包括造血细胞、脑、神经系统、表皮组织、各种与分泌吸收相关的组织及与肿瘤和无限增殖细胞系相关的组织等。锌指结构主要有两类：1、Zn原子与2个Cys、2个His残基结合(C₂/H₂)

如典型的TFⅢA的锌指结构是Cys-Cys……His-His排列。在这类锌指单元中有一段相对保守的序列：(Tyr,Phe)-X-Cys-X.(2-4)-Cys-X.3-Phe-X.5-Leu-X.2-His-X(3-5)-His。2、Zn原子与4个Cys残基结合(C₂/C₂)

Zn与Cys-Cys……Cys-Cys结合，一般特点是在内配体之间的一段氨基酸序列不象TFⅢA那样含有保守的酪氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸等疏水性氨基酸，但含有酸性氨基酸。很可能酸性氨基酸与碱性氨基酸形成盐桥，而不是形成一种疏水区。

此外，还有一类锌指结构在酵母的基因活化因子发现的，2个Zn原子紧密靠在一起与6个Cys配合，形成一个“锌簇”核心的结构。

在锌指蛋白中，Zn的作用是使蛋白质分子形成指型构象的骨架与DNA结合。锌指结构在许多与“蛋白-核酸”和“蛋白-蛋白”相互作用有关的蛋白里都有发现。锌指蛋白可以与双链DNA(dsDNA)或单链RNA结合，功能一般与基因表达的调控有关，可能有转录因子和信号传递因子的作用[Miller,1985,]。现有的研究表明，C₂H₂类型的锌指结构域在发育调控中起关键作用。例如，在DrosopilaKruppel(Rosenberg,1986)和hunchback(Tautz,1987)锌指蛋白中，此结构域与胚胎模式形成有关；在鼠Krox-20锌指蛋白中，此结构域与后脑模式形成及细胞增殖控制有关(Chavrier,1988；Wilkinson,1989)；有些锌指蛋白与肿瘤形成有关，如Gli-3在Greig综合症中(vortkamp,1991)，WT1在Wilm’s肿瘤中(Haber,1990)。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv 304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人锌指蛋白59的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人锌指蛋白10。

由于如上所述人锌指蛋白10蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人锌指蛋白10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人锌指蛋白10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人锌指蛋白10以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人锌指蛋白10的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人锌指蛋白10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人锌指蛋白10的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人锌指蛋白10的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人锌指蛋白10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人锌指蛋白10异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：