[发明专利]一种新的多肽——人已糖激酶蛋白13和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人己糖激酶蛋白13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

己糖激酶催化葡萄糖的磷酸化。这个可逆反应需要ATP的参与。这个反应是糖酵解反应的第一步，也是糖酵解反应的调速步骤。它将参与糖酵解的葡萄糖磷酸化以活化之。

在脊椎动物中主要有4类己糖激酶，分别是：Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ。Ⅳ类己糖激酶只在肝脏细胞和脾脏β细胞中表达，对胰岛素的分泌起重要作用，其分子量大约50Kd。Ⅱ类己糖激酶是骨骼肌中己糖激酶的主要形式。Ⅰ类和Ⅲ类己糖激酶分子量大约100Kd，其对葡萄糖的Km值略小。从结构上来说它们包含一个很小的N端憎水的膜结合结构域，后接两个极其相似的大约450残基的结构。第一个结构已经失去了催化活性，而演变为一个调控结构。

在酵母中有三种不同的己糖激酶：己糖激酶PⅠ,PⅡ和葡萄糖激酶。

在非球型红细胞性溶血性贫血病人的红细胞和血小板中，己糖激酶Ⅰ的活性只有正常的25％。在快速增殖的肿瘤组织中，己糖激酶Ⅱ的表达量超乎寻常得高，以提供肿瘤细胞对碳源供应的极高要求。己糖激酶Ⅱ可能是非胰岛素依赖型糖尿病的致病基因。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人己糖激酶蛋白12的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人己糖激酶蛋白13。

由于如上所述人已糖激酶蛋白13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人己糖激酶蛋白13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人己糖激酶蛋白13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人己糖激酶蛋白13以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人己糖激酶蛋白13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人己糖激酶蛋白13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人己糖激酶蛋白13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人己糖激酶蛋白13的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人己糖激酶蛋白13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人己糖激酶蛋白13异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中283-585位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1004位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人己糖激酶蛋白13蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。