[发明专利]一种新的多肽——含多重四——三共同肽重复结构域蛋白28和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——含多重TPR域蛋白28，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

四-三共同肽重复(TPR)是在许多蛋白中被确定为一种简并的34个氨基酸的序列，它以串联的3-16个特征序列模板形式出现，并形成支架结构以介导蛋白与蛋白间的反应以及装配多蛋白复合物。在人体及细菌的各种组织，核，细胞质及线粒体中发现含TPR域的蛋白。这些蛋白包括后期启动复合物(APC)亚基cdc16,cdc23以及cdc27,NADPH氧化酶亚基p67 phox，热震蛋白(hsp)90-结合亲免蛋白，转录因子，PKR蛋白激酶抑制剂以及过氧化物酶体与线粒体输入蛋白，磷酸酶PP5。每一个TPR模板由一对等长的反平行α-螺旋构成，并有8个保守的序列残基：-W-LG-Y-A-F-A-P-。相邻的TPR模板以平行的排列方式包装在一起，这样串联的TPR膜板结构由一系列规则的反平行α-螺旋构成。同样的角度及相邻α-螺旋的空间排列形成一个螺旋结构并具有一个两亲性的沟。多重-TPR特征序列蛋白折叠成一个带有适于识别靶蛋白的一个连续不断的沟的右手超螺旋结构，这是一种新的蛋白识别机制(Das AK,Cohen PW,EMBO J 1998；17:1192-1199)。不同的含TPR域的蛋白在各自的TPR域上有特异性底物结合位点，这些蛋白的TPR域之间相互作用，或者TPR域与非TPR域相互作用而介导蛋白与蛋白间的反应。

本发明的多肽与Caenorhabditis elegans中的含多重TPR域蛋白在蛋白水平上有61％的同一性和78％的相似性，且亦含有含多重TPR域蛋白家族其他成员所共有的各种特征，故认为本发明的新多肽为含多重TPR域蛋白，命名为含多重TPR域蛋白28，并以此推断该蛋白与Caenorhabditis elegans中的含多重TPR域蛋白相似，具有相似的生物学功能。该多肽及其抑制剂，激动剂，拮抗剂可用于诊断及防治与TPRs蛋白识别及TPRs介导的蛋白-蛋白间作用有关的疾病。

由于如上所述含多重TPR域蛋白28蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的含多重TPR域蛋白28蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新含多重TPR域蛋白28蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——含多重TPR域蛋白28以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码含多重TPR域蛋白28的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码含多重TPR域蛋白28的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产含多重TPR域蛋白28的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——含多重TPR域蛋白28的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——含多重TPR域蛋白28的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与含多重TPR域蛋白28异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中758-1519位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2876位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。