[发明专利]一种新的多肽——人过氧化物酶蛋白15和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人过氧化物酶蛋白15，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

过氧化物酶是血红素结合酶，通过把过氧化氢作为电子受体，而完成一系列生物合成和降解作用。过氧化物酶在细菌、真菌、植物和脊椎动物中有广泛分布。

过氧化物酶的血红素辅基是原卟啉Ⅸ，而血红素铁原子的第五配体是近侧组氨酸的咪唑基团，远侧组氨酸残基则作为过氧化反应的酸、碱催化剂。在大多数过氧化物酶中，这两个His及附近的残基序列或多或少都有一定的保守性。

过氧化物酶的保守序列为：(DET)-(LIVMTA)-X(2)-(LIVM)-(LIVMSTAG)-(SAG)-(LIVMSTAG)-H-(STA)-(LIVMFY)(H是近侧血红素结合位点)，LPO和Phlebia radiata的木质素酶Ⅲ无此序列；(SGATV)-X(3)-(LIVMA)-X-(FW)-H-X-(SAC)(H是远侧活性位点)，脊椎动物过氧化物酶(MPO、TPO、LPO和EPO)无此序列。

髓过氧化物酶(MPO)主要存在于粒细胞和单核细胞中，MPO在嗜中性细胞的依赖于过氧化氢的杀菌系统中起重要作用，而另一种动物过氧化物酶-甲状腺过氧化物酶(TPO)则与甲状腺激素的生物合成有关。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人过氧化物酶蛋白11的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人过氧化物酶蛋白15。

由于如上所述人过氧化物酶蛋白15蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人过氧化物酶蛋白15蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人过氧化物酶蛋白15蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人过氧化物酶蛋白15以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人过氧化物酶蛋白15的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人过氧化物酶蛋白15的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人过氧化物酶蛋白15的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人过氧化物酶蛋白15的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人过氧化物酶蛋白15的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人过氧化物酶蛋白15异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中764-1171位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1859位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人过氧化物酶蛋白15蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。