[发明专利]一种新的多肽——人肿瘤相关核蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人肿瘤相关核蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人肿瘤相关核蛋白基因编码的是一种核蛋白，编码此蛋白的基因至少通过三种不同的剪接方式编码三种独立的蛋白质，并且其中至少一种蛋白是细胞核蛋白，其他在细胞质中。

人肿瘤相关核蛋白基因编码的蛋白是一种DNA结合蛋白，它被认为通过与P53基因结合来调控DNA复制，野生型的P53基因是一种负调控的癌基因。而人肿瘤相关核蛋白基因的过量表达与肿瘤发生有紧密的相关性。

人肿瘤相关核蛋白基因由于其5′基因功能域的特征而被认为是类似看家基因的“生长控制”基因。这类基因家族特征包括高G+C碱基比例含量，无CCAAT和TATA盒，存在潜在的转录因子SP1结合位点及多重转录起始位点。这类基因在广泛的组织种类中处于一种低表达的水平。人肿瘤相关核蛋白基因是一种进化保守的并在细胞代谢过程中起作用的基因。(The Journal of BiologicalChemistry Vol 263:22 17150-17158 1988)

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人肿瘤相关核蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人肿瘤相关核蛋白12。

由于如上所述人肿瘤相关核蛋白12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人肿瘤相关核蛋白12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人肿瘤相关核蛋白12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人肿瘤相关核蛋白12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肿瘤相关核蛋白12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肿瘤相关核蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人肿瘤相关核蛋白12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人肿瘤相关核蛋白12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人肿瘤相关核蛋白12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人肿瘤相关核蛋白12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中1670-2002位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2489位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人肿瘤相关核蛋白12蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与人肿瘤相关核蛋白12蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。