[发明专利]一种新的多肽——人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

Down综合症，是一种由于人类染色体21(HC21)的三体性引起的疾病，是一种最常见的由遗传引起的智力发育迟缓，同时也是最常见出生婴儿染色体非整倍体(Antonarakis,1998)。HC21上的一些基因的针对性研究是对Down综合症进行病理性研究和单染色体上基因失常的分子病原学研究的必要步骤，研究较多的如ITSN基因。人的ITSN基因位于染色体21q22.1-21q22.2上，处在D21S319和D21S65标记之间。

采用选择性诱捕与特定的蛋白区域相同源的区域的实验手段，我们得到一段新的、全长的cDNA，它编码一种包含了许多蛋白-蛋白相互作用结构域的蛋白，存在两种主要的mRNA转录产物，其一是器官组织中普遍存在的表达mRNA(约5.3Kb)，另一是一种脑特异性的转录产物(约15Kb)。后者编码两段长分别为1220和1721个氨基酸残基的蛋白，其中较短的转录产物的ORF终止密码子在相连接的两个外显子之间断开，其最后一个外显子是跳跃性的；较长转录产物对应的蛋白与非洲爪蟾高度同源(相同率为81％)，称为交叉蛋白(intersectin protein,ITSN)。

上述脑特异性转录产物编码的两种蛋白都包含了5个SH3(Src homology 3)区域，2个EH(Eps 15 homology)区域和1个α-螺旋形成区域。而脑特异性的ITSN另外还编码三个特殊区域：一是GEF(guanine-nucleotide exchangefactors，鸟嘌呤核苷转换因子)，二是PH(pleckst rin homology，血小板-白细胞C激酶底物同源蛋白)，三是C2区域。人的ITSN蛋白的结构与它所涉及到的膜相关的分子运输和信号转导途径相一致，它在Down综合症中以及单基因失调中发挥着较为重要的作用。

本发明的多肽与上述的ITSN蛋白有71％的相同性，87％的相似性，并且包含ITSN蛋白特征性的保守序列，因此认为此蛋白是一种新的脑特异性Down综合症相关蛋白，具有与脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白相似的生物学功能，并命名为人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14。

由于如上所述人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人脑特异性Down综合症相关ITSN蛋白14异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少72％相同性的多核苷酸。