[发明专利]一种新的多肽——人DNA依赖蛋白激酶9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人DNA依赖蛋白激酶9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)是唯一的被DNA末端活化的真核生物激酶。生物化学的研究揭示，DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)的活化依赖于DNA末端结合蛋白的刺激。(Mutat Res 1997 ℃t；385(1):13-20)

DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)是一种由一个大的催化亚基和Ku杂二聚体组成，Ku杂二聚体通过与DNA的结合来调节激酶的活性。(Bi℃himie 1999 Jan-Feb；81(1-2):117-25)

DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)受DNA调节的机理目前已被研究清楚，实验的结果表明，DNA-PK与单链或双链的结合都是经由一些独立但又相互作用的位点。(EMBO J 1999 Mar 1；18(5):1114-23)

DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)的催化亚基是属于磷酸酰肌醇3-激酶家族，最近的遗传学和生物化学的研究表明，DNA-PK在免疫球蛋白/T细胞受体基因复合物、双链DNA的损伤修复、自身免疫等过程中有作用。(Curr Opin Cell Biol1996 Jun；8(3):325-30)

DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)是是一种重要的DNA损伤修复因子，如果细胞缺乏DNA-PK则会对辐射极为敏感。DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)还与淋巴细胞的修复有关，如其缺乏，则会导致免疫缺陷显性。(Bi℃himie 1999 Jan-Feb；81(1-2):117-25)

深入的研究发现，有一种蛋白与DNA-PK有极强的相互作用，这种蛋白与磷酸酶有一定的同源性，被称为DNA-PK相互作用蛋白(KIP)。KIP被推测与钙离子结合蛋白家族有关，KIP与DNA-PK的相互作用是DNA末端连接的调节因素，这与激酶和磷酸酶的相互作用有类似性。(Mutat Res 1997 ℃t；385(1):13-20)

RT-PCR的结果表明，KIP在很多人组织中广泛表达。根据放射杂交定位和荧光杂交定位的结果，编码KIP的多核苷酸被定位于人染色体组15的q24区域。(Bi℃him Biophys Acta 1999 Jan 18；1444(1):143-7)

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与人DNA-PK相互作用蛋白75的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人DNA依赖蛋白激酶9。

由于如上所述人DNA依赖蛋白激酶9蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人DNA依赖蛋白激酶9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人DNA依赖蛋白激酶9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人DNA依赖蛋白激酶9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA依赖蛋白激酶9的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA依赖蛋白激酶9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人DNA依赖蛋白激酶9的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人DNA依赖蛋白激酶9的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人DNA依赖蛋白激酶9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人DNA依赖蛋白激酶9异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；