[发明专利]一种新的多肽——人线粒体载体蛋白18和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人线粒体载体蛋白18，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

所有较为高等的真核生物都具有主要行使把呼吸能量转化为化学渗透能及化学能功能的线粒体。为了使线粒体行使其区室化能量互换功能，要求线粒体两膜之间持续进行代谢运输。穿过外膜的转运由可调节膜形成蛋白，电压依赖的阴离子载体(VDAC)传递，类似细菌的孔蛋白。而内膜转运则由一系列载体蛋白介导。线粒体载体是核基因的产物，必须被运入线粒体内膜。该家族成员都由三个重复的序列串联组成，每一重复序列约有100个氨基酸残基，其中含有两个假定的α-跨膜螺旋，这两段序列都是疏水性的，由一个延伸的亲水性区域(A,B与C)隔开，而三个串联的重复序列由较短的亲水氨基酸序列连接(a’及b’)。该蛋白家族的主要结构模式如下：多肽链的N-及C-端暴露于膜的同一侧，三个长的亲水性片段(A,B,C)位于膜的一边(N-及C-端的对面)，两个短的亲水性片段a’与b’在另一侧。转运过程中，蛋白构像发生改变，A,B,C环中的一个或更多个可能作为发夹结构插入酯质双分子层中。现已发现的线粒体载体蛋白家族成员，除了PMP47，都有相同的信号模式，它是重复域中最保守的区域之一，这段区域恰好位于第一个跨膜区域之后。PMP47的该信号模式与之略有不同，其特征保守残基主要位于跨膜(TM-)域边缘。TM-域1,3,5由能量转移蛋白信号终止，该信号模式即PX[DE]X[LIVAT][RK]X[LRH][LIVMFY]。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人线粒体载体蛋白14的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人线粒体载体蛋白18。

由于如上所述人线粒体载体蛋白18蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人线粒体载体蛋白18蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人线粒体载体蛋白18蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人线粒体载体蛋白18以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人线粒体载体蛋白18的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人线粒体载体蛋白18的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人线粒体载体蛋白18的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人线粒体载体蛋白18的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人线粒体载体蛋白18的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人线粒体载体蛋白18异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中1683-2186位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2819位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。