[发明专利]一种新的多肽——人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

碳代谢副产物阻遏蛋白(CCR4)是一种生物体内普遍存在的转录调控蛋白，通过在体内形成多亚基复合物，它可以影响很多基因的表达。

研究发现，尽管CCR4并不结合于DNA，但它在与非正常的DNA结合功能域结合后可以刺激转录过程。与其他转录调节因子相比，CCR4是受葡萄糖调节的。在两个转录调控功能域中，一个是葡萄糖相关的，它包含有一个富含谷氨酸盐-脯氨酸的结构区，这与很多真核生物中发现的转录因子所含有的结构区十分相似。研究发现，如CCR4缺少了亮氨酸重复结构和C末端，则其两个转录调控功能域不能组成有功能的CCR4。因此，亮氨酸重复结构和C末端对于连接两个转录调控功能域形成完整的CCR4有关键作用。(Mol Cell Biol 1994Jul；14(7):4522-31)

有进一步的研究结果显示，CCR4所含的亮氨酸重复结构除了对形成完整的CCR4有作用外，还对CCR4与其相关蛋白相互结合作用有重要作用。(Mol Cell Biol1994 Jul；14(7):4522-31)；(Genetics 1992 Dec；132(4):951-62)

酵母的CCR4蛋白是一些非发酵生长的调控基因(如葡萄糖-抑制乙醇脱氢酶ADH2等)表达过程中不可缺少的一种蛋白，并且也是SPT6和SPT10突变基因的校正基因，而SPT6和SPT10对于保持染色质的稳定性有作用。(Mol Cell Biol 1994Jul；14(7):4522-31)

免疫沉淀反应的结果表明，CCR4可以与至少4种蛋白形成复合物而起作用。(Mol Cell Biol 1994 Jul；14(7):4522-31)

CCR4相关蛋白——CAF1(POP2)是CCR4复合物的一种组成蛋白，它的同源蛋白在很多生物体内已有发现，比如人，线虫，爪蟾，鼠，酵母等等。CCR4相关蛋白(CAF1)在生物体内的主要功能是调控转录过程。CCR4相关蛋白(CAF1)的具体结构请参阅相关文献。(Mol Cell Biol 1995 Jul；15(7):3487-95)

尽管对CCR4相关蛋白的结构和功能的研究还不是十分清楚，但根据已有的研究，我们已经知道CCR4相关蛋白的部分功能。

CCR4通过形成多亚基复合物，可以影响很多酵母中的基因的表达。细胞周期调节激酶(DBF2)在细胞有丝分裂末期向G1期过度的过程中有重要作用，DBF2与CCR4以及CAF-1/POP2共同形成复合物，在细胞周期的基因表达和后来的有丝分裂的基因转录过程中有重要作用。(EMBO J 1997 Sep 1；16(17):5289-98)

人的B细胞移位蛋白(BTG1)是一种肿瘤抑制因子，因为其过度表达抑制了NIH 3T3细胞的增殖。碳代谢副产物阻遏蛋白(CCR4)的结合因子(hCAF-1)，是同源于鼠的CAF-1，酿酒酵母的CAF-1/POP2的。在体外，hCAF-1/BTG1复合物的形成依赖于BTG1(Ser-159)的p34cdc2激酶位点的磷酸化。hCAF-1/BTG1复合物对于细胞分裂和细胞增殖有重要且明显的调控作用。(Biochem J 1998 Dec 1；336(Pt 2):471-81)；(Wilcox,Scott,Subramanian,Ross,Adams-Burton,Stoltenborg and Corjay(1995)Circulation 92,I34-I35)

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人CCR4相关蛋白31的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16。