[发明专利]一种新的多肽——人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在生物体内存在一类蛋白，它们在真核及原核生物中均有相似的结构特征。这些蛋白在生物体内的作用是ATP依赖的，这类蛋白在生物体内的分布非常广泛，在各种生物中均发现有该蛋白的存在，其构成了一很大的蛋白家族，即ATP依赖的解螺旋酶超家族。

在细胞的众多活动中，RNA结构的调控如：前体RNA的剪接、剪接体的装配、蛋白翻译等都是必需的调节步骤。这些过程通常由各种不同的解螺旋酶来调节完成。解螺旋酶在很多RNA起重要作用的生物系统中均可检测到。它们广泛地分布于从原核生物(包括病毒)到低等及高等生物的各组织器官中，参与细胞核及线粒体的分裂、RNA的编辑、rRNA的加工、转录起始、，细胞核mRNA的转运及mRNA的降解等过程。解螺旋酶被认为是细胞发育及分化过程中的重要因子，其中的一些还在病毒单链RNA的转录及复制过程中起作用[Arri Eisen,John C.Lucchesi,Bioessays,1998,20:634-641]。其在生物体内为癌症、神经系统疾病及免疫系统疾病的诊断、预防及治疗提供了有效的手段。

研究发现，ATP依赖的解螺旋酶超家族的成员含有多个保守的序列基序，其中一些是该家族的成员所特异的；而另一些不仅在该家族成员中存在，且在一些ATP结合蛋白中亦存在。这些序列基序中的一个为“D-E-A-D盒”，存在于ATP结合蛋白的B基序中。该解螺旋酶超家族中的另一些成员含有一“D-E-A-H盒”，该盒有组氨酸残基替换了“D-E-A-D盒”中的天冬酰胺，该盒结构基序是解螺旋酶超家族所特异的。

“D-E-A-D盒”及“D-E-A-D盒”均存在于ATP依赖的解螺旋酶的B结构基序中，所有该家族成员的B结构基序均含有如下所示的一致性序列片段：

[LIVMF](2)-D-E-A-D-[RKEN]-X-[LIVMFYGSTN]；

该序列片段是调节ATP水解与否的关键位点，该基序的突变将导致ATP水解的抑制，从而影响酶发挥正常的生理学功能。ATP依赖的解螺旋酶是细胞发育及分化过程中的重要调节因子，其在生物体内通常与一些神经系统疾病、免疫系统疾病、肿瘤及癌症等疾病的发生相关。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人ATP依赖的解螺旋酶蛋白68的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11。由于如上所述人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人ATP依赖的解螺旋酶蛋白11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。