[发明专利]一种新的多肽——人铁－硫铁氧化还原蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人铁-硫铁氧化还原蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

有氧条件下ATP的生成是通过一系列的电子传递来完成的，经过一系列的中间物的传递，在真核细胞中，这些中间物都定位于线粒体内膜上。电子传递体主要包括黄素蛋白、铁硫蛋白、细胞色素和一种醌化合物，出来醌化合物以外其它都是疏水性分子。了解的最清楚的铁硫蛋白是细菌和叶绿体的铁氧化还原蛋白，线粒体的电子传递链中也有。铁硫蛋白是一族与蛋白质的4个Cys残基复合在一起的含铁和硫原子的蛋白质，也称非血红素铁蛋白。铁硫蛋白的铁和硫通常以等摩尔存在，一般为2Fe-2S或4Fe-4S，但是有些铁蛋白含有一个铁原子，并以四面体形式与4个Cys残基的巯基配位。

在2Fe-2S铁氧化还原蛋白中，有四个半胱氨酸残基与铁硫中心结合。其中三个半胱氨酸残基聚集成簇：C-{C}-{C}-[GA]-{C}-C-[GAST]-{CPDEKRHFYW}-C，三个C是2Fe-2S的结合部位。

本发明的多肽包含2Fe-2S铁氧化还原蛋白的特征性的保守序列，是一种新的2Fe-2S铁氧化还原蛋白，具有类似的生物学功能。本发明命名为人铁-硫铁氧化还原蛋白12

由于如上所述人铁-硫铁氧化还原蛋白12蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人铁-硫铁氧化还原蛋白12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人铁-硫铁氧化还原蛋白12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人铁-硫铁氧化还原蛋白12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人铁-硫铁氧化还原蛋白12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人铁-硫铁氧化还原蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人铁-硫铁氧化还原蛋白12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人铁-硫铁氧化还原蛋白12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人铁-硫铁氧化还原蛋白12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人铁-硫铁氧化还原蛋白12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中102-437位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1717位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人铁-硫铁氧化还原蛋白12蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与人铁-硫铁氧化还原蛋白12蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。

本发明还涉及本发明的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人铁-硫铁氧化还原蛋白12表达异常所引起疾病的药物的用途。