[发明专利]一种新的多肽——人过氧化酶25和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人过氧化酶25，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

过氧化氢(H₂O₂)是体内的一种主要的活性氧形式(ROS)。在需氧代谢过程中，过氧化氢的产出效率相当高。在一般的情况下，在线粒体中，NADH脱氢酶和呼吸链的泛半醌的中间步骤中，1-2％的氧可以被转化成O₂。超氧可以被线粒体的过氧化氢歧化酶转化成过氧化氢。低浓度的过氧化氢会引发细胞凋亡，高浓度的过氧化氢会引起坏死。许多报道证明过氧化氢在在刺激剂(例如：神经酰胺、抗菌素A、亚醌酸盐和肿瘤坏死因子等)引起的细胞毒和坏死中起重要作用。在人类的一些疾病如阿尔兹海墨氏症、糖尿病、中风和AIDS痴呆综合症中也起一定作用。

在细胞内使细胞免受过氧化氢毒害的主要的酶防御系统是谷胱甘肽氧化还原循环和过氧化氢酶。过氧化氢酶可以将过氧化氢转化成H₂O和O₂。过氧化氢酶主要存在于细胞的过氧化物酶体中，在肝脏和红细胞中活性最高，在肾脏和脂肪组织中次之，在肺和脾脏中活性中等，在心脏和脑中活性相当低。

在真核生物和一部分的原核生物中，过氧化氢酶由四个相同的亚基组成。每个亚基结合于一个血红素Ⅸ基团。一个保守的色氨酸是血红素的近中心配基，还包括一个保守的精氨酸也与血红素结合相关。一个保守的组氨酸是催化所必须的。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人过氧化酶10的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人过氧化酶25。

由于如上所述人过氧化酶25蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人过氧化酶25蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人过氧化酶25蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人过氧化酶25以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人过氧化酶25的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人过氧化酶25的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人过氧化酶25的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人过氧化酶25的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人过氧化酶25的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人过氧化酶25异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中309-998位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2253位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人过氧化酶25蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。