[发明专利]一种新的多肽——人肌球蛋白重链11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人肌球蛋白重链11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

生物体内的细胞运动由细胞骨架蛋白与存在于细胞膜内的一些蛋白共同作用来完成。细胞骨架蛋白在细胞内作为一种收缩蛋白，促进着细胞间的相互运动，而细胞运动所需的能量由ATP提供。在所有的动物细胞内均存在两种主要的收缩蛋白：肌动蛋白及肌球蛋白。肌动蛋白通常以多聚及溶解状态存在于细胞内，其与肌球蛋白相互作用，并通过中间介导物的协同作用，共同促进体内细胞间的运动及细胞周期细胞核分裂过程的完成。

肌球蛋白由重链分子及轻链分子共同组成，其中轻链通过与肌球蛋白重链N末端的球形结构域相互作用联结在一起，构成完整的肌球蛋白分子。球形结构域中又含有一ATP结合位点及一肌动蛋白结合位点，这两个结合位点是肌球蛋白与肌动蛋白相互作用，调控细胞运动进行的重要作用中心。肌球蛋白重链C末端的结构域主要形成一α螺旋结构，该结构域与第二个肌球蛋白重链单体的螺旋结构相互作用，形成完整的肌球蛋白分子。研究发现，肌动蛋白重链分子在动物的所有组织中均有表达，其在生物体卵子发育及细胞分化过程中起着重要的调控作用，调节着生物体内一些重要的生理学反应的进行。该蛋白分子通过对周围环境中钙离子等物质含量的变化做出正确反应，以调控相关的代谢及发育过程的正常进行。其突变或表达异常将直接影响生物体内一些相关生物学功能的完成，进而引发各种相关的疾病。

人们已克隆得到了多种不同生物来源的肌球蛋白重链12蛋白，1995年，Steinacker等人又从人中克隆得到了一肌球蛋白重链12蛋白，并发现该蛋白的氨基酸序列与已知的鼠肌球蛋白重链12的氨基酸序列有95.8％的同源性，由此可知，该肌球蛋白重链蛋白可能在进化上具有高度的保守性。研究发现，该蛋白在人体的各种组织中均有表达，其在生物体卵子发育及细胞分化过程中起着重要的调控作用。该蛋白的突变或表达异常通常将导致生物体内细胞周期过程进行的异常，进而影响一系列与之相关的代谢过程的进行。该蛋白通常与生物体内一些相关的胚胎发育紊乱性疾病、遗传性疾病、免疫系统疾病及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病[Steinacker J.M.,Opitz-Gress A.et al.,1995,Cytogenet CellGenet,69:53-58]。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人肌球蛋白重链的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人肌球蛋白重链11。

由于如上所述人肌球蛋白重链11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人肌球蛋白重链11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人肌球蛋白重链11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人肌球蛋白重链11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肌球蛋白重链11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肌球蛋白重链11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人肌球蛋白重链11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人肌球蛋白重链11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人肌球蛋白重链11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人肌球蛋白重链11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。