[发明专利]一种新的多肽——人红细胞内收蛋白alpha亚基11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人红细胞内收蛋白alpha亚基11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

真核细胞的胞质膜含有被称为血影蛋白膜骨架的结构蛋白系统，血影蛋白膜骨架在组成特定膜整合蛋白及偶联这些蛋白到胞质蛋白上起作用。血影蛋白是膜骨架的主要成分，它是一种与F-肌动蛋白在两端连接的棒状蛋白。肌动蛋白与血影蛋白以及辅助蛋白在红细胞中一起形成最短的正形穹顶结构，短肌动蛋白丝与五至七个血影蛋白分子相连构成多边形网络。内收蛋白是一种膜骨架蛋白，促使血影蛋白与肌动蛋白相连，这一反应是由钙/钙调蛋白调控的。内收蛋白由两个亚基构成：分子量为103000的alpha亚基以及分子量为97000的beta亚基，内收蛋白也是蛋白激酶C的底物。脑膜以及肝，肾，肺和睾丸中存在有红细胞内收蛋白的免疫相关的同种型。内收蛋白位于上皮组织的细胞与细胞接触位点，它具有组装血影蛋白以及肌动蛋白网络的作用。内收蛋白的alpha亚基与beta亚基高度同源(Joshi et al(1991)J.Cell Biol.115：665-675)。

内收蛋白的alpha亚基由三个不同的区域组成，N-端域是耐蛋白水解的，含有疏水性及亲水性残基，球形结构，中间一个区域连接N-与而C-端域是对蛋白水解酶极为敏感的尾，C-端域中富含亲水性残基，含有磷酸化位点，结合钙调蛋白的位点，并且是连接血影蛋白及肌动蛋白所必需的。编码alpha亚基的基因位于四号染色体上(Joshi R，Gilligan DM，Otto E，McLaughlin T，Bennett V，J Cell Biol 1991 Nov；115(3)：665-75)。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv 304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人红细胞内收蛋白alpha亚基的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人红细胞内收蛋白alpha亚基11。

由于如上所述人红细胞内收蛋白alpha亚基11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人红细胞内收蛋白alpha亚基11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人红细胞内收蛋白alpha亚基11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人红细胞内收蛋白alpha亚基11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人红细胞内收蛋白alpha亚基11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人红细胞内收蛋白alpha亚基11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人红细胞内收蛋白alpha亚基11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人红细胞内收蛋白alpha亚基11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人红细胞内收蛋白alpha亚基11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人红细胞内收蛋白alpha亚基11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中287-595位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1149位的序列。