[发明专利]一种新的多肽——人NPAT蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人NPAT蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

真核生物细胞周期转运的调控过程中涉及多种周期蛋白(cyclin)和周期蛋白依赖的激酶(Cdk)的共同作用。这些蛋白分别构成了周期蛋白家族及周期蛋白依赖的激酶家族两大蛋白家族。Cdk与cyclin相互结合形成异源二聚体复合物，其具有蛋白激酶的作用活性。其中cyclin为激酶的调节亚基，而Cdk为催化亚基；Cdk只有在与相应的cyclin相结合并由一些蛋白激酶的磷酸化或去磷酸化作用下，才具有蛋白激酶的活性。该两个蛋白家族的成员在细胞内协同作用，共同调控细胞周期过程的正常进行。

Cdk2即为周期蛋白依赖的蛋白激酶家族的成员，该蛋白在生物体内与相应的周期蛋白相结合，调控着细胞有丝分裂进入S期。在其调控过程中还涉及多种不同蛋白的协同作用，如NPAT蛋白等。CDK蛋白在此过程中催化NPAT蛋白的磷酸化及去磷酸化过程，以激活该蛋白在细胞内的作用活性，促进细胞有丝分裂由G1期进入S期。这些蛋白的突变或表达异常将直接导致生物体各组织细胞有丝分裂途径的异常，进而影响机体的生长与发育，引发一系列相关的代谢紊乱性疾病。

人们已从鼠及人等多种不同的生物体内克隆得到多种不同的NPAT蛋白，并发现该蛋白在不同的生物体内均具有较高的同源性及相似的生理学功能。1997年，Platzer等人又从人中克隆得到了一NPAT蛋白，该蛋白被定位于人的第十一条染色体上，该基因与其下游基因ATM均为人持家基因家族中的成员，在生物体的多种组织及细胞内均有不同水平的表达。该蛋白与ATM基因的表达方向相反，且共用部分的5’端核酸序列。研究发现，这两种蛋白在生物体内的表达具有一定的相关性，它们的突变或表达异常均与生物体内一些常染色体基因紊乱性疾病的发生密切相关，并为这些疾病的诊断及治疗提供了科学的依据[PlatzerM.，Rotman G.et al，1997，Genome Res，7：592-605]。

由上可知，NPAT蛋白在生物体内参与调控多种重要的生物学过程，其作为一种持家基因在生物体的各种组织及细胞中均有一定的表达量。该蛋白在生物体内与一些细胞周期蛋白激酶协同作用，在细胞有丝分裂过程中起着重要的调控作用，调控细胞有丝分裂由G1期至S期的转变过程。该蛋白的突变或表达异常将影响一系列与之相关的代谢过程的进行，进而引发各种相关的疾病。该蛋白在生物体内通常与发育及代谢紊乱性疾病、共济失调毛细血管扩张等常染色体基因紊乱性疾病及乳房癌、结肠癌等恶性肿瘤、癌症等疾病的发生密切相关。该蛋白还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人NPAT蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人NPAT蛋白12。

由于如上所述人NPAT蛋白12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人NPAT蛋白12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人NPAT蛋白12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人NPAT蛋白12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人NPAT蛋白12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人NPAT蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人NPAT蛋白12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人NPAT蛋白12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人NPAT蛋白12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人NPAT蛋白12异常相关的疾病的方法。