[发明专利]一种新的多肽——人Kruppel相关的DNA结合蛋白42和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人Kruppel相关的DNA结合蛋白42，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

转录作用的调节是依靠DNA和蛋白质的混合物的相互作用进行控制的，这类蛋白包括具有高度保守序列的蛋白结构域。最为典型的结构域为螺旋-转角-螺旋结构、螺旋-环化-螺旋结构和锌指结构。在细胞分化和发展过程中，每种上述结构域都参与转录因子结合到它们相对应的DNA识别位点的反应，导致基因表达的特异性活化或阻遏(K1ug,A.,and Schwabe,J.W.R.,1995)。

锌指基因家族属于人类最大的基因家族，在转录调节中发挥重要的作用，它可以细分为许多的基因亚家族，其中有一种为Cys2/His2型锌指基因，其锌指结构域中有一段高度保守的序列TGEKPYX(X表示任何一种氨基酸)。Cys2/His2型锌指蛋白包含特异性结构--Kruppel锌指蛋白，首先在果蝇Kruppel蛋白中找到。

血细胞生成是一个复杂的生理过程，需要在胚胎发生、胎儿时期以及出生后各个阶段上基因表达的准确调节。这种调节过程的破坏，可能导致血细胞生成的紊乱。一些锌指蛋白能够调节造血细胞分化为红细胞(GAGA-1和EKLF)、巨核细胞(GAGA-1和GAGA-2)、淋巴细胞。而且，许多锌指蛋白还与血液恶性肿瘤的胚胎发生有较为密切的关系。

Cys2/His2型锌指基因家族都有重复的锌指结构域，包括由两个Cys和两个His结合到一个锌离子上形成的指形结构(Jacobs,G.H.,1992)。其中三分之一是Kruppel类似基因，在项=相连的锌指结构域之间含有保守的TGEKPYX序列。

在果蝇的生长阶段，Kruppel类似锌指基因是关键的转录遏制剂。在哺乳动物和人类中，这类基因涉及胚胎发育和血细胞生成。比如，鼠的Krox20基因和鼠、人类共有的PL2F基因与后脑的菱脑节发育有关(Cook,M.,Gould,A.,Brand,N.et al.)；EKLF蛋白通过结合cis作用因子调节β-球蛋白的表达，从而调节血红蛋白从胎儿γ-球蛋白到成年β-球蛋白的转变。

本发明的多肽与上述的Kruppel相关的DNA结合蛋白有96％的相同性，98％的相似性，并且包含Kruppel锌指蛋白家族特征性的保守序列，因此认为此蛋白是一种新的DNA结合蛋白，具有与Kruppel锌指蛋白相似的生物学功能，并命名为人Kruppel相关的DNA结合蛋白42。

由于如上所述人Kruppel相关的DNA结合蛋白42蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人Kruppel相关的DNA结合蛋白42蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人Kruppel相关的DNA结合蛋白42蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人Kruppel相关的DNA结合蛋白42以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人Kruppel相关的DNA结合蛋白42的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人Kruppel相关的DNA结合蛋白42的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人Kruppel相关的DNA结合蛋白42的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人Kruppel相关的DNA结合蛋白42的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人Kruppel相关的DNA结合蛋白42的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人Kruppel相关的DNA结合蛋白42异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；