[发明专利]一种新的多肽——人亲环蛋白11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人亲环蛋白11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

亲环蛋白是一种普遍存在的系统发育上保守的蛋白家族，该家族成员与蛋白免疫抑制药物环孢菌素A(CsA)结合。CsA是一种真菌环十一肽，被作为预防移植排斥的治疗试剂而广泛使用。经常用于肾脏，肝脏，心脏以及骨髓移植，并可治疗多种自身免疫疾病[Kahn,Cyclosporin:Biological Activity And ClinicalApplications Grune & Stratton,Orlando,FL(1983)]。亲环蛋白具有肽基脯氨酸顺反异构酶(Ppiase)或旋转异构酶活性[Fischer,et al.,Nature,337:476-478(1989)]，而CsA活性抑制这种酶活性[Takahashi,et al,Nature,337:473-475(1989)]。这种酶催化寡肽中脯氨酸-亚胺酸间的顺反异构化，并加快几种蛋白的重折叠，包括胶原蛋白[Bachinger,J.Biol.Chem.,262:17144-17148(1987)]。除抑制Ppiase活性之外[Takahashi,et al.,Nature,337:473-475(1989)],CsA还令胶原蛋白三股螺旋的折叠变慢。

亲环蛋白11是一种与环孢菌素A(CsA)结合的分子量为11kD的蛋白质，它具有参与调节生物性质重要的受体活性的功能。亲环蛋白与免疫抑制剂环孢菌素A(CsA)亲合性结合。亲环蛋白与CsA结合的主要决定位点是亲环蛋白结合域中的色氨酸残基[Lui,et al.,Biochemistry,30:2306-2310(1991)]。人亲环蛋白11具有一段独特的序列：GKPLH，参与结合金属离子。现有研究发现，人亲环蛋白11可能与另一种免疫抑制性与CsA不同的新药物结合更为紧密，并调节细胞中其他的调节或信号途径。结合或抑制类似人亲环蛋白11的复合物可用于治疗对环孢菌素A不敏感的寄生虫感染疾病。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人亲环蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人亲环蛋白11。

由于如上所述人亲环蛋白11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人亲环蛋白11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人亲环蛋白11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人亲环蛋白11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人亲环蛋白11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人亲环蛋白11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人亲环蛋白11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人亲环蛋白11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人亲环蛋白11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人亲环蛋白11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中331-630位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2672位的序列。