[发明专利]一种新的多肽——人突触的通道相关蛋白15和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人突触的通道相关蛋白15，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

突触是细胞与细胞接触的特定区域，有效传导脑中神经元之间的信号。突触的细胞骨架在神经系统的突触形成以及维持中起到重要作用。定位离子通道于特定的亚细胞位点对于神经元信号极为重要。电压门控K⁺通道在不同的神经元区域集中，包括突触前端，神经纤维结以及树突，它们在这些区域内调控局部膜兴奋性。Shaker-亚家族K⁺通道由与膜相关的鸟酐酸激酶PSD-95(突触后密集区95)家族介导，把K⁺通道亚基C-端胞质尾区与PSD-95蛋白中的两个PDZ(亦被称为GLGF或是DHR)域直接结合。PDZ-域作为蛋白与蛋白作用的独立组份作用，它们存在于其他与连接相关的分子，含有PDZ-域的多肽在膜特定位点广泛参与蛋白形成。PDZ域是一种蛋白特征序列模板，它在定向细胞与细胞连接的蛋白中起到重要作用。与细胞骨架相关蛋白的PDZ域介导细胞骨架与各种膜蛋白C-端的反应。突触前膜及突触后膜都具有精巧的细胞结构，这对于突触的功能构建是十分重要的。神经元具有许多不同类型突触，而突触的细胞骨架在定位不同的受体及各自适当的离子通道中起重要作用。对神经肌肉接头以及脊髓中抑制突触的研究表明，细胞骨架在突触后膜上内在地参与突触成分的聚集[Froehner,Annul Rev.Neurosci.,16:347-368(1993),Hall et al.,Cell/Neuron,72:99-121(1993),Gautam et al.,Nature,377:232-2 36(1995),Kirsch et al.,Nature,266:745-748(1993),Meyer et al.,Neuron,15:563-572(1993),Kirsch et al.,J.Neuroscience,15:41484156(1995)]。

Chapsyn-110是突触蛋白的PSD-95家族成员，它是一种突触的通道相关蛋白，具有异源多体化以及NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸)受体聚合活性。NMDA受体对于神经系统兴奋毒性中活性依赖的粘性极为重要。NMDA谷氨酸受体在兴奋性突触处汇集。Chapsyn-110在神经元突触传递中起到重要作用。该蛋白可用于探测及分析特定的神经疾病以及被试者的受精能力[Kim E,Niethammer M,Rothschild A,Jan YN,Sheng M,Nature1995 Nov2；378(6552):85-8]。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人突触的通道相关蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人突触的通道相关蛋白15。

由于如上所述人突触的通道相关蛋白15蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人突触的通道相关蛋白15蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人突触的通道相关蛋白15蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人突触的通道相关蛋白15以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人突触的通道相关蛋白15的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人突触的通道相关蛋白15的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人突触的通道相关蛋白15的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人突触的通道相关蛋白15的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人突触的通道相关蛋白15的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人突触的通道相关蛋白15异常相关的疾病的方法。