[发明专利]一种新的多肽——人泛素－结合酶13和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人泛素-结合酶13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

蛋白质的水解起着维持细胞内蛋白质平衡的重要作用。在一些特定的信号通路中，信号分子的降解是使信号通路正常进行的必要条件。例如，在有丝分裂中，cyclin(细胞周期蛋白)必须在正确的时间被降解，否则会引起细胞增殖的紊乱。泛素-蛋白酶水解系统在降解cyclin中起着重要作用。

泛素首先在-COOH末端与泛素活化酶E1形成硫脂键而被活化，然后被转移给E2或UBC(泛素-结合)酶家族的一员，最后直接或间接通过泛素-蛋白连接酶E3把泛素转移到目标蛋白的赖氨酸残基上。

泛素-结合酶(UBC)的作用是催化泛素与目标蛋白的共价连接。在大部分的生物中，UBC都以多种形式出现，意味着UBC在许多不同的细胞活动中的重要作用。UBC的半胱氨酸残基在泛素-硫脂键的形成中是必须的。通过对许多UBC蛋白序列的同源比较发现，有一个半胱氨酸残基附近的序列是高度保守的。这一段序列是：[FYWLSP]-H-[PC]-[NH]-[LIV]-x(3,4)-G-x-[LIV]-C-[LIV]-x-[LIV]其中C是活性位点的残基。

泛素-蛋白酶水解系统不但作用于cyclin的降解，在许多其他的蛋白代谢中也发挥着重要的作用。例如，在酵母中，G-蛋白耦连的受体和运输蛋白在配基结合时会被泛素修饰。蛋白酶体不识别这些被泛素化的蛋白。而在哺乳动物质膜上的许多受体和至少一个离子通道会被泛素化而受到负调控。

泛素系统还在降解受损伤的蛋白上起作用。泛素标记因为过氧化、神经毒或者突变而导致异常的蛋白，使蛋白酶得以识别并水解之。不能正确水解泛素化的蛋白会破坏细胞渗透压。在许多的神经疾病中都发现了泛素化的蛋白聚集。在阿尔兹海墨氏症、疯牛病、舞蹈病和小脑共济失调等组织的内涵体/溶酶体中也能发现泛素化蛋白的聚集。

有些真核生物的表达调控基因，例如NF-B/IB,p53,c-Jun,Notch，甾体调控的结合蛋白和MAT2也受到泛素-蛋白酶系统的调控。因此泛素-蛋白酶系统在基因表达中也起一定的作用。另外，也有报道指出泛素-蛋白酶系统的失调会引起肌肉瘫痪。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人泛素-结合酶10的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人泛素-结合酶13。

由于如上所述人泛素-结合酶13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人泛素-结合酶13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人泛素-结合酶13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人泛素-结合酶13以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人泛素-结合酶13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人泛素-结合酶13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人泛素-结合酶13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人泛素-结合酶13的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人泛素-结合酶13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人泛素-结合酶13异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；