[发明专利]一种新的多肽——人磷酰基运输蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人磷酰基运输蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

磷酸烯醇丙酮酸依赖的糖磷酸转移系统(PTS)是细菌中主要的碳水化合物转运系统。PTS能催化进入到其中的底物发生磷酸化作用，并将之移位，穿过细胞膜。PTS的主要作用机制如下：(1)将磷酸烯醇丙酮酸(PEP)中的磷酰基团转移到PTS中的酶Ⅰ(EⅠ)处，EⅠ按次序将磷酰基团送到磷酰基运输蛋白(HPr)上并与之结合为磷酸-HPr复合物；(2)磷酸-HPr复合物转移磷酰基团到达一个糖特异性的透性酶复合体(EⅡ/EⅢ)中。作为糖分解的媒介物起作用的PEP还能发生构象变化，由烯醇式变为酮式，从而产生很高的能量，确保了整个过程中所需能量的供给。

HPr是一种小分子量蛋白，存在于细胞质中，约含70-90个氨基酸残基，在一些细菌中，HPr常常包含在分子量较大的蛋白中，成为其一部分，这种分子量较大的蛋白中还包含了EⅢ(Fru)，一些情况下还包含EⅠ。在HPr的N-末端部位有一个高度保守的His残基，作为EⅠ的磷酰基团受体起作用，这个区段的氨基酸序列如下：G-[LIVM]-H-[STA]-R-[PA]-[GSTA]-[STAM]；HPr的中央部位有一个保守的Ser残基，只存在于格兰氏阳性菌中，它能被依赖ATP的蛋白激酶磷酸化，在整个糖转运过程中起到调节的作用，这个区段的氨基酸序列如下：[GSADE]-[KREQTV]-X(4)-[KRN]-S-[LIVMF](2)-X-[LIVM]-X(2)-[LIVM]-[GAD]。

在磷酸-PTS复合物蛋白中，磷酸连接在His残基的N-1或N-3位置，N-3位点相对更加稳定一些，因此在不受其它条件干扰情况下，磷酰基团总是很自然地从N-1位点向N-3位点迁移。

PTS系统普遍存在于格兰氏阳性菌和格兰氏阴性菌中，在许多病菌或病原体的生长、繁殖和代谢过程中发挥重要作用，如存在于人的嘴和上呼吸道的链球菌以及存在于人肠道中的大肠杆菌、葡萄球菌等。在许多重要的生理过程中PTS系统都是重要的组成成分，比如研究较多的“葡萄糖效应”。另外，PTS系统还与其它的代谢途径和遗传途径以及信号转导有关。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人磷酰基运输蛋白10的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人磷酰基运输蛋白12。

由于如上所述人磷酰基运输蛋白12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人磷酰基运输蛋白12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人磷酰基运输蛋白12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人磷酰基运输蛋白12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人磷酰基运输蛋白12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人磷酰基运输蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人磷酰基运输蛋白12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人磷酰基运输蛋白12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人磷酰基运输蛋白12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人磷酰基运输蛋白12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；