[发明专利]一种新的多肽——人转录激活蛋白亚单位14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人转录激活蛋白亚单位14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

真核细胞的转录需要两类蛋白。通用转录因子和激活蛋白。前者指导基本转录，后者负责接受各种刺激后发生的细胞、组织及基因特异性转录。GABP是一种转录激活蛋白，它是ETS家族的一个成员。它由α、β两个亚单位组成。α亚单位的-COOH端具有ETS功能域，通过此区域可与启动子的A/CGGAA/TA/GY序列相结合并激活RNA的转录。在-COOH端的4个半胱氨酸是受氧化还原调节的位点，这些位点的修饰情况影响蛋白与DNA的结合以及α亚单位与β亚单位的结合。(1)Yurrii Chinenov,Tonya Schmidt,ea tl(1998)J Biol Chem,273(11)6203-6209

而β亚单位含有4.5个串联排列的锚蛋白重复序列，每个重复单位包括一对反向平行的卷屈螺旋和一个末端含一个I型转角的环。这些结构主要介导了与α亚单位的异二聚化，从而加强α亚单位与DNA的结合。(2)Adrian H.Batchelor,Derek E.Piper,Fabienne Charles de la Brousse,Steven L.McKnight,CynthiaWolberger(1998)science 279:1037-1041

现已发现GABP是utrophin的启动子的激活因子，utrophin是一种存在于神经-肌肉接头处的营养蛋白。因此可以通过GABP上调utrophinD的表达，从而治疗杜氏肌营养不良。(3)Khurana TS,Rosmarin AG,Shang J et al.(1999)MolBiol Cell10(6):2075-86

GABP还参与了OTR(催产素受体)基因启动子的激活，而催产素可介导分娩、及射乳。因此GABP可用于生殖功能的调节。(4)Hoare S,Copland J A,Wood T G etal(1999)Endocrinology 140(5)2268-79

此外GABP还参与了肿瘤坏死因子的转录激活，由此用于抗肿瘤(5)TomarasGD,Foster DA,Burrer CM et al.J Leukoc Biol 199966(1):183-93治疗肿瘤的另一条途径是干扰多胺的代谢。因为真核细胞的生长都需要多SSAT基因产物是多胺代谢的限速酶，NRF2，一种GABP的同源物，能与SSAT基因的PRE反应元件结合，促进SSAT基因的转录。(6)Yanlin Wang,Lei Xiao,ArunthathiThiagalingam(1998)J Biol Chem 273(51)34623-34630

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人转录激活蛋白亚单位49的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人转录激活蛋白亚单位14。

由于如上所述人转录激活蛋白亚单位14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人转录激活蛋白亚单位14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人转录激活蛋白亚单位14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人转录激活蛋白亚单位14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人转录激活蛋白亚单位14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人转录激活蛋白亚单位14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人转录激活蛋白亚单位14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人转录激活蛋白亚单位14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人转录激活蛋白亚单位14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。