[发明专利]一种新的多肽——人核糖体蛋白S5－13和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人核糖体蛋白S5-13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

蛋白的正确翻译对所有细菌及高等生物都是非常重要的，对蛋白翻译调控机制的研究是从大肠杆菌中得到的。蛋白的翻译过程主要由各种氨酰基-tRNA合成酶、各种tRNA及核糖体共同作用来完成，其中核糖体和其他辅助因子在一起提供了翻译过程的全部酶活性，这些酶活性只有在核糖体整体结构完整的情况下才会具备。因而，核糖体及其组成的各亚单位在生物体内协同作用，起着重要的生理学功能。

对大肠杆菌中的一些信息抑制因子进行研究发现，这些因子决定着蛋白的翻译水平。在很多情况下，这些因子不是tRNAs就是核糖体蛋白，这些蛋白的突变将直接影响蛋白的翻译水平。1990年，人们从大肠杆菌中得到了核糖体蛋白S4、S5，并发现两者与酵母的SUP44基因编码的酵母核糖体蛋白S4有较高的同源性。三者均以单拷贝形式存在，且没有内含子。这是最早发现的核糖体蛋白，其序列结构及功能在进化上都是高度保守的[All-Robyn J.A.,Brown N.,et al.,MolCell Biol,1990,10:6544-6553]。

核糖体蛋白S5是小核糖体亚单位中的一个组成成分。在大肠杆菌中，S5蛋白在核糖体亚单位30S的聚集及作用过程中起重要作用。该蛋白根据其序列特征，被认为是核糖体蛋白家族中的成员。S5蛋白的突变将导致蛋白翻译错误率的明显增加，因而该蛋白表达异常将直接影响生物体内蛋白的翻译，从而产生一些蛋白突变体的形成，从本质上改变蛋白的生理学功能。一些主要蛋白的功能异常将直接导致机体的代谢异常，引发各种相关的代谢紊乱性疾病、免疫系统疾病及各种肿瘤及癌症等。

S5蛋白由166-254个氨基酸残基所组成。该蛋白具有保守的特征性序列区域，该结构区域位于蛋白的氨基末端，并富含甘氨酸残基。其由以下保守的特征性序列组成：G-[KRQ]-X(3)-[FY]-X-[ACV]-X(2)-[LIVMA]-[LIVM]-[AG]-[DN]-X(2)-G-X-[LIVM]-G-X-[SAG]-X(5,6)-[DEQ]-[LIVMA]-X(2)-A-[LIVMF]。所有的S5蛋白均具有这一保守的序列特征，这一保守的结构序列是蛋白发挥正常生理功能的主要调节区域，为蛋白与RNA正确结合及蛋白正确翻译调控的中心区域。该结构域的突变及表达异常将导致蛋白功能异常，从而不能形成完整的核糖体30S亚单位，从而，影响蛋白的翻译过程，从而引起各种与蛋白翻译异常及突变相关的疾病，如：代谢紊乱性疾病、免疫系统疾病及一些肿瘤及癌症的发生等。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人核糖体蛋白S5-8的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人核糖体蛋白S5-13。

由于如上所述人核糖体蛋白S5-13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人核糖体蛋白S5-13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人核糖体蛋白S5-13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人核糖体蛋白S5-13以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人核糖体蛋白S5-13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人核糖体蛋白S5-13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人核糖体蛋白S5-13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人核糖体蛋白S5-13的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人核糖体蛋白S5-13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人核糖体蛋白S5-13异常相关的疾病的方法。