[发明专利]一种新的多肽——过氧化氢氧化还原酶9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--过氧化氢氧化还原酶9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

过氧化氢具有杀伤微生物，净化，漂白以及消毒活性，它被作为贴眼透镜的消毒剂，织物的漂白剂以及合法的食品添加剂等广泛使用。然而，过氧化氢可能会产生具高度反应性的自由氧，它强烈的氧化效应将致使蛋白变性。过氧化氢氧化还原酶是一种存在于所有需氧细胞中的酶类，它分解过氧化氢为分子氧及水，即催化两分子的过氧化氢氧化为一分子的氧并还原为两分子的水。它主要的功能是保护细胞免受过氧化氢的毒性作用。在真核生物及一些原核生物中它由四个相同的亚基构成。每个亚基与一个(正铁)血红素Ⅸ基团结合。其中一个保守的酪氨酸是近端的血红素结合配体，作为血红素近极面配体作用，含有这个残基及其周围氨基酸的区域构成了第一个特征序列模板R-[LIVMFSTAN]-F-[GASTNP]-Y-x-D-[AST]-[QEH],Y，其中含有一个保守的精氨酸残基，它参与血红素结合。第二个特征序列模板中含有一个保守的活性位点残基，组氨酸残基，它对于酶的催化机制较为重要：[IF]-x-[RH]-x(4)-[EQ]-R-x(2)-H-x(2)-[GAS]-[GASTF]-[GAST](Murthy M.R.N.,Reid T.J.Ⅲ,Sicignano A.,Tanaka N.,Rossmann M.G.,J.Mol.Biol.152:465-499(1981)；Melik-Adamyan W.R.,Barynin V.V.,Vagin A.A.,BorisovV.V.,Vainshtein B.K.,Fita I.,Murthy M.R.N.,Rossmann M.G.,J.Mol.Biol.188:63-72(1986)；von Ossowki I.,Hausner G.,Loewen P.C.,J.Mol.Evol.37:71-76(1993))。

有研究发现，放疗时，过氧化氢氧化还原酶增强肿瘤细胞损伤并使正常细胞免受辐射损伤，此外有一种输卵管过氧化氢氧化还原酶与精子膜外表面结合，因而可用来保护或保存精子，人工授精以及诊断男性或女性不育。

本发明的多肽具有上述特征序列模板，且与过氧化氢氧化还原酶家族成员有相似的生物学功能，故而被认为是该家族的新成员，命名为过氧化氢氧化还原酶。该多肽及其激动剂，抑制剂，拮抗剂可用于诊断及防治与过氧化氢氧化还原有关的疾病，有助于诸如纤维肉瘤等肿瘤的治疗并可用来保护或保存精子，人工授精以及诊断男性或女性不育。

由于如上所述过氧化氢氧化还原酶9蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的过氧化氢氧化还原酶9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新过氧化氢氧化还原酶9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--过氧化氢氧化还原酶9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码过氧化氢氧化还原酶9的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码过氧化氢氧化还原酶9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产过氧化氢氧化还原酶9的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--过氧化氢氧化还原酶9的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--过氧化氢氧化还原酶9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与过氧化氢氧化还原酶9异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。