[发明专利]一种新的多肽——视网膜结合位点12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--视网膜结合位点12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

视觉的光化学不同于光合作用的光化学。但是，视觉和光合作用，都起始于激发电子从一个分子轨道到另一个较高能量的轨道。

多细胞动物眼的光敏色素不同于叶绿素，那是一种称为视紫红质的复合物，它是一种调节视觉的光线吸收分子，由一种脱辅基蛋白一视蛋白和一种直链多烯(11-顺式黄醛)组成，它们共价结合在同侧视网膜的发色团上。它受激发时，不是进行氧化，而是视黄醛的异构化(C(11)-C(12)双键异构化)，即通过同侧视网膜异构为反侧视网膜来吸收光子，从而影响视觉。视网膜的异构作用将引起蛋白的组成变化。视蛋白是一个有7个跨膜区域的膜整和蛋白，属于G-蛋白伴随受体家族。

在脊椎动物中已经发现了4种不同的主要色素。视杆细胞包含视质紫色素，它在昏暗光线中调节视觉。视锥细胞负责在亮光线下的视觉调节，能感受颜色，而且视觉非常敏锐，它包含有3个或更多的彩色色素(例如在哺乳动物中：红色，兰色和绿色)。

脊椎动物的眼睛是非常复杂的器官，它们具有各种各样类型的特化细胞。进入眼的光线为眼睛前部的清晰组织-角膜所折射。光线穿过水房到达晶状体，晶状体里充满着称为晶体蛋白的蛋白质，调节晶状体形状，使光学成像聚焦于视网膜(排列在眼后部的一薄层组织)上。视网膜是由几种不同的细胞层所组成的神经组织。其中的有些细胞如视杆细胞和视锥细胞含有视色素。另一些细胞通过突触连接到视杆或视锥，并连接到另外的神经细胞，以把冲动传到大脑[Applebury M.L.,HargraveP.A.1986.Vision Res.26:1881-1895]。

果蝇的眼睛由800个小眼面或小眼组成。每一个小眼包含8个光感器(R1-R8):R1到R6细胞是外部细胞，R7和R8是内部细胞。这3种类型的细胞(R1-R6,R7和R8)都表达特异性的视蛋白。进化与视蛋白相关的蛋白包括乌贼视网膜色素和视网膜光异构酶，视网膜光异构酶将各种各样的视网膜异构体转换成11-同侧视网膜和哺乳动物的视网膜色素上皮细胞(RPE)RGR，一个可能参与视网膜异构作用的蛋白。

上述蛋白的视网膜结合位点是一个保守的赖氨酸残基，它位于第7个转膜转角的中间区域。以下是包括这个保守赖氨酸残基的特征序列：[LIVMWAC]-[PGAC]-X(3)-[SAC]-K-[STALIMR]-[GSACPNV]-[STACP]-X(2)-[DENF]-[AP]-X(2)-[IY]。其中K代表视网膜结合位点。

本发明人的多肽亦含有上述视网膜结合位点，与上述表达特异性视蛋白属于同一个家族。

由于如上所述视网膜结合位点12蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的视网膜结合位点12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新视网膜结合位点12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--视网膜结合位点12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码视网膜结合位点12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码视网膜结合位点12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产视网膜结合位点12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--视网膜结合位点12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--视网膜结合位点12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与视网膜结合位点12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。