[发明专利]一种新的多肽——人干扰素α受体19.68和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人干扰素α受体19.68，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

一类胞质因子，在生物体内的多种细胞类型中具有多效性效应。干扰素蛋白除具有常见的抗病毒活性外，还具有抗菌、抗原虫、免疫调控及细胞生长调节等多种重要的生物学活性。Ⅰ型干扰素包括干扰素α(INF-α)、干扰素β(INF-β)及干扰素ω(INF-ω)。人干扰素α蛋白家族的成员至少含有23个不同的蛋白多肽，而只含有一个干扰素β蛋白多肽。所有的不同的干扰素α蛋白多肽均具有较高的相似性，它们的蛋白序列通常具有大于70％的同源性；而这些蛋白多肽与干扰素β分别具有约25％的相似性。干扰素α蛋白与干扰素β蛋白在生物体内与共同的种特异的受体结合，以调控生物体内各种相关的信号途径。

人们已从干扰素α受体复合物中克隆得到了两个功能性组成成分，人干扰素α受体1及人干扰素α受体2。人干扰素α受体1基因编码一约63KDa的受体蛋白；干扰素α受体2基因编码一约115KDa的受体蛋白，该受体蛋白与Ⅰ型干扰素紧密结合，并与受体蛋白1协同作用，以形成具有生物学活性的信号复合物，调控体内多种重要的生物学信号途径的发生及其作用[Domanski P.,M.Witte etal.,1995,J Biol Chem,270:21606]。

研究发现，干扰素α受体1蛋白对所有Ⅰ型干扰素的作用均是必需的，其在体内介导各种Ⅰ型干扰素α相关的信号途径的发生。该受体蛋白由一个细胞外结构域、一个跨膜结构域及一个细胞内结构域组成。其中细胞外结构域又由两个功能性结构域--结构域1及结构域2组成，两个结构域被一个由三个脯氨酸残基组成的结构基序所分开。这两个结构域有19％的同一性和50％的相似性，每个结构域又可分别分为两个相似的约由100个氨基酸残基组成的亚结构域。这两个结构域在生物体内分别负责与相应的干扰素蛋白结合，以调控干扰素在体内的作用活性。

1998年，Lu等人又从人中克隆得到了一人干扰素α受体1蛋白，并对其结构及生物学活性进行了研究。该受体蛋白亦具有如上所述的保守的一致性序列片段，且其结构域2中还含有一保守的赖氨酸残基。研究发现，虽然结构域1与结构域2对受体的生物学活性都是必需的，但其结构域2的作用更为重要[JiLu,Anan Chuntharapai et al.,1998,J Immunol,160(4):1782-1788]。该结构域中的保守的赖氨酸残基是受体与相应干扰素识别结合的重要活性位点，该结构域的突变或表达异常将直接影响体内相应的细胞信号途径及免疫应答调控的进行，进而引发各种相关的代谢及发育紊乱性疾病。该蛋白在生物体内通常与一些相关的发育及代谢紊乱性疾病、免疫系统疾病、信号途径异常相关的疾病及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人干扰素α受体1的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人干扰素α受体19.68。

由于如上所述人干扰素α受体19.68蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人干扰素α受体19.68蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人干扰素α受体19.68蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人干扰素α受体19.68以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人干扰素α受体19.68的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人干扰素α受体19.68的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人干扰素α受体19.68的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人干扰素α受体19.68的抗体。