[发明专利]一种新的多肽——光敏色素12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--光敏色素12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

光敏色素是一种普遍存在的植物蛋白，它能感受光信号，作为调节的光感受器起作用。目前，在真核生物中也发现一些蛋白酶类，它们的催化反应部位含有类似于某些植物的光敏色素C-末端的结构，如丝氨酸蛋白激酶、苏氨酸蛋白激酶、酪氨酸蛋白激酶等；另外，一些细菌中的组氨酸蛋白激酶也属于这个家族。

光敏色素家族以二聚体的形式存在，由两个相同的124Kd的亚基组成，每一个亚基都共价地附着一个线形四吡咯发色团。四吡咯发色团附着在Cys位点上，Cys位于高度保守区域并且也是整个区域中最为保守的氨基酸残基，这个区域都含有这样一段氨基酸序列：[RGS]-[GSA]-[PV]-H-X-C-H-X(2)-Y。

在植物中，光敏色素能介导红光对于生理和分子反应的影响。经过一个可逆的光化学变化，它能够从无活性的红光吸收状态(Pr)变为有活性的远红光吸收状态(Pfr)。光敏色素能感受光信号，在转录水平上调节一些主要的核编码多肽，能调节许多形态发生反应，如植物枝茎的伸长、开花；在细胞水平上，它也能产生许多生理效应，如对某些绿藻中叶绿素的调控。

在植物光敏色素信号通路中，核苷酸激酶2(NDPK2)是其上游的主要组成部分，在人和动物细胞中，也发现有NDPK，它作为一种肿瘤遏制物发挥作用；另外，在人和动物体内的多种蛋白激酶与一些病毒性疾病有关，如一种致婴儿胃肠炎的病毒--轮状病毒即与丝氨酸蛋白激酶在体内的活性相关。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与光敏色素的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为光敏色素12。

由于如上所述光敏色素12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的光敏色素12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新光敏色素12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--光敏色素12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码光敏色素12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码光敏色素12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产光敏色素12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--光敏色素12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--光敏色素12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与光敏色素12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中990-1307位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1366位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。